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固定剂 |
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固定剂在香水中是一种用来降低其蒸发率的天然或合成物质，用以在更多的挥发性化学成分添加进时，可以提高其稳定性。[1]
介绍
这使得最终产品能够保持其原有的香味之馀，同时其使用寿命更长。固定剂是香水工业不可或缺的部份。一般用来作固定剂的物质包括有：龙涎香、檀香木、麝香、香根草、鸢尾根和香柠檬。在某些情况下，例如生产肥皂时，也可使用蓖麻油。固定剂由于其低挥发度，固定剂的香味在香水方面的语言会称之为其主调或基调。
种类
- 四氧化锇（Osmium tetroxide）
- 甲醛（formaldehyde）
- 戊二醛（glutaraldehyde）
- 其它固定剂
- 醋酸铀（uranyl acetate）}既是一种固定剂又是一种染色剂。它可以与磷酸基团反应，从而固定DNA和RNA，以及含有磷酸基团的磷脂，从而对膜结构的保存有帮助。另外，它可以与蛋白中的酸性基团（如天冬氨酸残基、谷氨酸残基）和碱性基团（如赖氨酸残基）反应，从而起固定蛋白的作用。但醋酸铀不能很好得保存糖原。通常在使用了醛类固定剂和四氧化锇固定剂后，再使用$0.5-1.0\%$的醋酸铀水溶液，进行第三重固定。操作醋酸铀时要特别注意，尽管市售的醋酸铀放射性不强，但它仍是一种潜在的致癌物。醋酸铀应密封于棕色瓶阴凉处保存。
- 丙烯醛（acrolein）是一种三碳醛，含有一个醛基和一个双键。它比甲醛和戊二醛活泼，渗透组织的速度也比甲醛和戊二醛快。它可以很好地保存蛋白和磷脂，最好作为甲醛或戊二醛固定液的添加剂使用。通常使用市售密封的100%丙烯醛液体，固定时使用的浓度小于1%。它溶于水的速度慢，毒性很大，着火点低，储存和使用它都比上述另外两种醛类危险，非必要时不推荐使用。丙烯醛非常活泼且挥发性很强，即使是操作稀释后的溶液也要格外小心，所有与丙烯醛相关的操作绝不能离开通风橱进行，并且最好有经验丰富的操作者在场指导。丙烯醛适合于固定大块的样品，植物组织或有厚细胞壁的微生物样品，以及表面覆盖有几丁质或蜡质的样品。但丙烯醛不适用于整个动物的灌注固定。
- 丹宁酸（Tannic acid）是一种从植物中提取的物质，泛指五倍子酸（gallic acid）糖苷或多聚糖苷。大分子很难渗透到组织中，因此电镜中使用低分子量的丹宁酸。丹宁酸既是一种强的固定剂，能固定许多蛋白以及糖类衍生物，又是一种媒染剂，能增强对重金属（如铀、铅）的吸收，从而增强样品反差，特别是细胞外膜、弹性纤维、细胞连接、肌肉纤维等。由于丹宁酸渗透速度慢，通常只用作渗透速度快的固定剂的添加剂使用。丹宁酸没有固定的用法，0.5-2.0%丹宁酸和0.5mg/ml皂角苷（saponin，增加丹宁酸的渗透速度）与2.5-4.0\%戊二醛一起使用可以得到良好的效果。但固定时间要延长到3-4小时以上，并且推荐使用醋酸铀作第三重固定。丹宁酸适用于灌注固定。
- 重铬酸钾（potassium dichromate）在固定中有两种作用，一是缓冲作用，二是固定作用，帮助保存脂类和糖类。在处理神经组织样品时，因为重铬酸钾能很好地保存髓磷脂，可与四氧化锇配合使用，作为第二重固定剂。但需要注意的是，重铬酸钾是一种致癌物质，应小心操作。
- 高锰酸钾（potassium permanganate）可以与脂类反应，增强膜结构的反差。可以保存DNA和糖原，但有一定的抽提作用，几乎无法固定细胞内的颗粒性或纤维状结构，可能会引入一些假象。穿透性强，适用于有厚细胞壁或蜡质层包被的植物及昆虫样品。使用时可以不加缓冲液，固定时间不宜太长，,0.5-1.0%高锰酸钾溶液固定30分钟到2小时。