荧光显微镜

荧光显微镜原图链接来自 天津医科大学肿瘤医院 的图片

荧光显微镜是一种使用荧光或磷光物质的光学显微镜，或除此之外使用反射和吸收用于研究的有机或无机物质的特性。“荧光显微镜”是指使用荧光来产生一个图像的任何显微镜，无论是更简单的设置像落射荧光显微镜，或更复杂的设计如共聚焦显微镜，其使用光学切片，以获得更好的分辨率的荧光图像。

2014年10月8日，诺贝尔化学奖颁给了艾力克·贝齐格（Eric Betzig），W·E·莫尔纳尔（William Moerner）和斯特凡·W·赫尔 （Stefan Hell），奖励其发展超分辨荧光显微镜（Super-Resolved Fluorescence Microscopy），带领光学显微镜由微米µm（1米的10的负6次方，百万分之一米）进入纳米nm（1米的10的负9次方，十亿分之一米）级尺度中。

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原理

样品被照射特定波长（或波段）的光，其被荧光团吸收，导致它们发出更长波长的光（例如，和被吸收的光不同的颜色）。通过使用光谱发射滤片，该照明光被从弱得多的发射荧光中分离出来。

近年来在生物学研究中，荧光标签被广泛地使用来标定生物分子，使荧光显微镜变得更加重要。它以水银灯或氙气灯为光源，搭配具激发滤片，发散滤片滤片组的光学仪器。

目前被普遍使用的荧光显微镜，是属于落射荧光显微镜（Epi-Fluorescence Microscopes，见右图），是指激发光的来源和观察的位置（接目镜），皆位于样品的同方，通过相同的光路。这些显微镜被广泛应用于生物学，并且是更先进的显微镜设计的基础，例如共聚焦显微镜或全内反射萤光显微镜(TIRF)。

光源

荧光显微镜要求强烈的，近乎单色光的照明，这是一些普遍的光源，比如卤素灯泡不能提供的。四种主要类型的光源的使用，包括氙气灯或带有激发滤片(Excitation Filter)的水银灯，激光，超连续光谱光源，和高功率发光二极管(LED)。激光被最广泛地用于更复杂的荧光显微技术，像共聚焦显微镜或全内反射萤光显微镜(TIRF)。而氙气灯，水银灯，和发光二极管（LED）与分色激发滤片通常被用于广角落射荧光显微镜(Epi-Fluorescence Microscopes)。

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