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蛹虫草优良菌株繁育及栽培技术推广应用案例由于近年来我国林业产业结构调整，东北林区全面禁伐，作为传统食用菌栽培的主要原料木屑减少、导致食用菌袋料成本提升，制约了诸如黑木耳等主要林下资源产业的发展。

一、应用场景

由于近年来我国林业产业结构调整，东北林区全面禁伐，作为传统食用菌栽培的主要原料木屑减少、导致食用菌袋料成本提升，制约了诸如黑木耳等主要林下资源产业的发展。蛹虫草属非木质技术密集型食药用菌，在当前推进促进林下资源产业发展背景下，以蛹虫草补充、替代现有传统黑木耳等食用菌种类，符合东北地区乃至全国食用菌发展需求。该技术自2016年以来，先后在黑龙江省、吉林省、辽宁省及内蒙古自治区等虫草生产基地进行推广应用，均获得了良好的效果。

二、主要解决的问题

（1）通过3种菌株复壮方法的比较分析，得出蛹组织分离法是蛹虫草复壮的最佳方法，且小麦组织分离法为常规性复壮方法；

（2）首次提出了蛹虫草母种扩繁技术——试管传代联合固态菌丝涂面法，进一步提高了母种遗传稳定性和扩繁效率；

（3）首次获得适于蛹虫草产业化生产的合成液体种培养基配方，大幅提升液体种制备能力；

（4）综合利用光照增产技术，对其栽培条件进行优化，建立了一套高产优质蛹虫草的栽培方法，实现了蛹虫草周年化生产。

三、技术要点

（1）蛹虫草菌株复壮技术采用蛹组织分离法，将退化蛹虫草菌种制作成液体菌种，采用注射法接种至蛹体上，经70~80天培养，至子座成熟，选取长势快且粗壮的子座5根，悬挂至含有PDA培养基的三角瓶中，瓶口用牛皮纸包好，待形成菌落，转接至平板培养基中，待菌落直径为1.5 cm，即得复壮菌株。

（2）蛹虫草优良产业化母种扩繁技术母种培养基配方：马铃薯200 g/L，葡萄糖20 g/L，琼脂粉18 g/L，蛋白胨5 g/L，磷酸二氢钾3 g/L，硫酸镁1.5 g/L，维生素B1 50 mg/L，加热至溶化；将活化的蛹虫草菌种取菌落前段2 mm处的菌丝接入母种培养基中，每管接入2 mm × 2 mm；在散射光，光照强度50 lx，20℃条件下培养5 d；选取菌落形态良好，且菌丝粗壮，深橙黄色的母种管，刮取菌丝，移入20 mL菌株稀释液中；取上述母种培养基，每管加入以上菌株稀释液0.8 mL，均匀涂布于斜面上；按以上培养条件培养3 d，即得扩繁母种。

（3）蛹虫草产业化高质液体种制备工艺在40 L培养瓶中，放入25 L液体种培养基，在121°C高压灭菌30 min。待其冷却后，将扩繁母种连同培养基切成条状（0.3×8 cm），接入冷却的培养瓶中，每瓶1支，在温度19°C，转速120 rpm，吹气量1 L/min条件下，恒温培养6 d，使用前用无菌水稀释30倍。

（4）全光照富硒蛹虫草产业化栽培向基础培养液中添加亚硒酸钠0.16 g/L，确保栽培培养基亚硒酸钠浓度为100 mg/ kg，制成富硒栽培培养液；选用培养盆，每盆加入小麦500 g，富硒栽培培养液850 mL，小麦常温浸泡24～36 h后，121℃条件下高压灭菌1 h，制得富硒栽培培养基；在超净工作台中，每盆均匀接入液体菌种，接种后采用全光照培养模式培养。

栽培条件为发菌阶段（3～5天）：在温度16℃，湿度30%～50%条件下，进行弱光照培养，光照强度为50 lx，光质为白色；转色阶段（2～3天）：在温度18℃，湿度30%～50%条件下，进行强光照培养，光照强度为300 lx，光质为白色；诱发原基阶段（10～12天）：在温度18℃，湿度30%～50%条件下，进行弱光照与强光照每12 h交替培养，弱光光照强度为50 lx，强光光照强度为300 lx，光质为白色；子座生长阶段（30～35天）：在温度22℃，湿度85%～90%条件下，进行弱光照与强光照每12 h交替培养，弱光光照强度为50 lx，同时于强光照培养时添加红光，红光光强为100 lx，白光光强为200 lx，即总光照强度为300 lx；子座顶端膨胀且不再生长后进行采收，45℃烘干，即得优质富硒北虫草干品。

四、应用成效

该技术采用自主知识产权技术，依托中央财政林业示范推广项目，建立蛹虫草产业化生产栽培推广示范基地2处，近五年扩繁蛹虫草母种5000余支，制备蛹虫草液体种3500 L，产出蛹虫草鲜草4.34万公斤，蛹虫草产量、虫草素及多糖含量提升了9.04%、69.42%、24.06%，高于《卫生部关于批准蛹虫草为新资源食品的公告（2009年第3号）》标准，成果在黑龙江省、吉林省、辽宁省及内蒙古自治区7家虫草生产基地进行推广应用，均获得了良好的推广效果和显著的经济效益。

五、适用范围

本技术适用于林下食药用菌栽培产业。