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色谱法是中国的一个科技名词。

汉字是世界上最古老的文字之一[1],已有六千多年的历史。从仓颉造字的古老传说到公元前1000多年前甲骨文的发现,汉字有着深厚的历史底蕴。后来的演变经历了几千年的漫长历程,在形体上逐渐由图形变为笔画,象形[2]变为象征,复杂变为简单;在造字原则上从表形、表意到形声。

名词解释

色谱法(化学中物质的分离和分析方法)一般指色谱分析(一种分离、分析的方法)

色谱分析是指按物质在固定相与流动相间分配系数的差别而进行分离、分析的方法。其按流动相的分子聚集状态可分为液相色谱、气相色谱及超临界流体色谱法等。按分离原理可分为吸附、分配、空间排斥、离子交换、亲合及手性色谱法等诸多类别。按操作原理可分为柱色谱法及平板色谱法等。色谱法已成为应用最广、药典收载最多的一类分析方法。

色谱分析(chromatographic analysis)是20世纪发展起来的一种有效的分析和分离技术,也称为色层分析,简称为层析。层析法是俄国植物学家茨维特(Tswett)在20世纪初发明的。他将植物色素的石油醚提取液注入碳酸钙柱,再加入石油醚到柱内,使之自由流下,分出叶绿素带(绿色)和胡萝卜素带(黄色)。随着层析法的发展,陆续出现了前沿层析法、置换层析法、分配层析法、纸层析法、离子交换层析法等。层析法已成为生物技术中不可缺少的分离、鉴定和制备的方法。

基本原理

色谱分析有两个要素——流动相和固定相。在流动相从固定相的一端流到另一端的过程中,加在固定相起始端的溶质随流动相流动,并在流动相和固定相之间来回转移。不同的溶质与这两相的亲和力大小不同,溶质的移动速度也不同,因而得到分离。固定相一般是固体,也可以是固体上附着液体;流动相是液体或气体。

色谱分析具有很多优点:分离效果好,设备简单,操作方便,条件较温和,方法多样,能适应不同的需要。其缺点主要是:处理量小,周期长,不能连续操作;有的层析介质价格昂贵,有时找不到合适的介质。

色谱分析(层析)有各种类型。按照固定相使用的形式,可分为柱层析、纸层析、薄层层析。按照溶质的展开方式,可分为前沿层析、置换层析、洗脱层析。按照流动相的物理状态,可分为气相层析与液相层析,以及超临界流体层析等。按照分离机理,可分为分配层析、吸附层析、离子交换层析、排阻层析、疏水层析、离子对层析、亲和层析、键合相层析。按照固定相和流动相的相对极性,可分为正相层析与反相层析。

在层操作时,单组分洗脱剂对多组分样品的洗脱效果常常不够满意。不是先洗出的组分混杂在一起,就是后洗出的组分出峰时间长,峰宽增加。为了改善分辨率、改变峰形或缩短层析时间,有时需要在层析过程中改变流动相的组成(pH、离子强度)。分阶段改变流动相的组成,流动相的组成呈阶梯状变化,称为阶段洗脱。逐渐改变流动相的组成,流动相的组成呈曲线或直线状变化,称为梯度洗脱。流动相形成梯度可用梯度洗脱仪。高效液相层析仪中常用几个泵分别输送不同的溶剂,控制各个泵的流量,就能控制洗脱剂的组成。

改善层析分离效果的方法有:改变流动相的组成或pH,改变固定相,改变温度等。在液相层析中以改变流动相的组成最重要。其余要注意的条件有:柱要细而长;分离介质填充要紧密、均匀,颗粒细密、大小分布均匀;操作温度保持恒定;样品用量少;流速慢而恒定。

参考文献