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色譜法是中國的一個科技名詞。

漢字是世界上最古老的文字之一[1],已有六千多年的歷史。從倉頡造字的古老傳說到公元前1000多年前甲骨文的發現,漢字有着深厚的歷史底蘊。後來的演變經歷了幾千年的漫長曆程,在形體上逐漸由圖形變為筆畫,象形[2]變為象徵,複雜變為簡單;在造字原則上從表形、表意到形聲。

名詞解釋

色譜法(化學中物質的分離和分析方法)一般指色譜分析(一種分離、分析的方法)

色譜分析是指按物質在固定相與流動相間分配係數的差別而進行分離、分析的方法。其按流動相的分子聚集狀態可分為液相色譜、氣相色譜及超臨界流體色譜法等。按分離原理可分為吸附、分配、空間排斥、離子交換、親合及手性色譜法等諸多類別。按操作原理可分為柱色譜法及平板色譜法等。色譜法已成為應用最廣、藥典收載最多的一類分析方法。

色譜分析(chromatographic analysis)是20世紀發展起來的一種有效的分析和分離技術,也稱為色層分析,簡稱為層析。層析法是俄國植物學家茨維特(Tswett)在20世紀初發明的。他將植物色素的石油醚提取液注入碳酸鈣柱,再加入石油醚到柱內,使之自由流下,分出葉綠素帶(綠色)和胡蘿蔔素帶(黃色)。隨着層析法的發展,陸續出現了前沿層析法、置換層析法、分配層析法、紙層析法、離子交換層析法等。層析法已成為生物技術中不可缺少的分離、鑑定和製備的方法。

基本原理

色譜分析有兩個要素——流動相和固定相。在流動相從固定相的一端流到另一端的過程中,加在固定相起始端的溶質隨流動相流動,並在流動相和固定相之間來迴轉移。不同的溶質與這兩相的親和力大小不同,溶質的移動速度也不同,因而得到分離。固定相一般是固體,也可以是固體上附着液體;流動相是液體或氣體。

色譜分析具有很多優點:分離效果好,設備簡單,操作方便,條件較溫和,方法多樣,能適應不同的需要。其缺點主要是:處理量小,周期長,不能連續操作;有的層析介質價格昂貴,有時找不到合適的介質。

色譜分析(層析)有各種類型。按照固定相使用的形式,可分為柱層析、紙層析、薄層層析。按照溶質的展開方式,可分為前沿層析、置換層析、洗脫層析。按照流動相的物理狀態,可分為氣相層析與液相層析,以及超臨界流體層析等。按照分離機理,可分為分配層析、吸附層析、離子交換層析、排阻層析、疏水層析、離子對層析、親和層析、鍵合相層析。按照固定相和流動相的相對極性,可分為正相層析與反相層析。

在層操作時,單組分洗脫劑對多組分樣品的洗脫效果常常不夠滿意。不是先洗出的組分混雜在一起,就是後洗出的組分出峰時間長,峰寬增加。為了改善分辨率、改變峰形或縮短層析時間,有時需要在層析過程中改變流動相的組成(pH、離子強度)。分階段改變流動相的組成,流動相的組成呈階梯狀變化,稱為階段洗脫。逐漸改變流動相的組成,流動相的組成呈曲線或直線狀變化,稱為梯度洗脫。流動相形成梯度可用梯度洗脫儀。高效液相層析儀中常用幾個泵分別輸送不同的溶劑,控制各個泵的流量,就能控制洗脫劑的組成。

改善層析分離效果的方法有:改變流動相的組成或pH,改變固定相,改變溫度等。在液相層析中以改變流動相的組成最重要。其餘要注意的條件有:柱要細而長;分離介質填充要緊密、均勻,顆粒細密、大小分布均勻;操作溫度保持恆定;樣品用量少;流速慢而恆定。

參考文獻