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  • 2021/9/14 截至台湾13日晚间6时，全球至少2亿2455万8780例确诊COVID-19。图为北市大型疫苗接种站。
    • （中央社台北14日电）日本COVID-19（2019冠状病毒疾病）疫苗覆盖率急起直追，至少施打一剂的人口比率在七大工业国集团（G7）中已超越如今垫底的美国。“中国鞋都”福建莆田市陷入严峻疫情，鞋厂多已停工。
培养基
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培养基（Medium）是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。

  • 不同培养基可根据实际需要，添加一些自身无法合成的化合物，即生长因子。
  • 有些微生物，如自养型微生物，不需要碳源，所以上述物质只具有一般性。
  • 发酵培养基从广义上而言，是指可供微生物细胞生长繁殖所需的一组营养物质与原料。
  • 同时其也为微生物培养提供其他所必须的条件。发酵培养基的基本作用在于满足菌体的生长，促进产物的形成。
  • 合成培养基：是指原料其化学成分明确、稳定的培养基。适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律，但是培养基营养单一，价格较高，不适合用于大规模工业生产。
  • 天然培养基：这一类培养基采用天然的原料，所以其原料来源丰富（大多为农副产品）、价格低廉、适于工业。然而原料品质等方面不加控制会影响生产的稳定性。
  • 培养基依用途可分为下列六种：

基础培养基：微生物生长基本要素，可提供大部分微生物生长。 滋养培养基 Enriched media：培养基中加入特殊养分，如血液、血清或动植物抽出液，能提供挑剔性的菌株生长养分。 选择培养基 Selective media：培养基中加入抑制某一群微生物生长的物质，却又不影响另一群微生物的繁殖；或含特定菌体生长良好之营养源，使其大量生长。 鉴别培养基 Differential media：培养基中含特殊营养成分，依代谢情况不同，使生长的各种微生物显现出不同特性。 鉴定细菌特性用培养基：用以测定微生物特性之培养基，如产色素培养基、运动性试验培养基、酵素能力试验培养基、基质利用培养基、碳水化合物发酵试验培养基、测定特殊代谢物试验培养基。 保存及携送培养基：维持微生物数目，使在接种至培养基前不增加也不减少。

  • 培养基型态可分为下列三种：

固体培养基：固体培养基含有 1.5～2.0 %的琼脂。 半固体培养基：含有 0.5～0.8% 的琼脂。 液体培养基：不含琼脂，主要用于微生物生长培养增值分离或生化鉴定。

培养基的培养与保存

  • 选择培养基（Selective mediag）：培养基加入某种特殊化学物质，能阻止一群（group）细菌的生长，但不影响另一群细菌的繁殖。
    • 例如eosin methylene blue medium（EMB，伊红美蓝培养基）及MacConkey medium（麦康凯培养基）能让革兰氏阴性杆菌〔如Escherichia coli（大肠杆菌）〕生长，但抑制革兰氏阳性球菌（如葡萄球菌）。
    • 如一些含抗生素的分离培养基（如CAN）能选择性的抑制某些微生物（肠内菌）生长， 但能让特定微生物（葡萄球菌）生长良好。
  • 培养基中含有某种特殊化学物质，使能在其生长的各种细菌显出不同的特性，例如MceConkey medium（麦康凯培养基）生长的乳糖发酵性革兰氏阴性杆菌呈粉红色菌落，EMB agar呈深紫色或蓝黑色，而乳糖非发酵性在两者则呈无色菌落。
    • 事实上，MacConkey（麦康凯）及 EMB agar 除了作为区别性培养基外，亦是选择性培养基，因革兰氏阳性球菌不能在其上生长。
  • 又如不同种（species）的链球菌在BAP上呈现不同的溶血型 式，因此BAP可区分溶血性和非溶血性细菌，所以BAP同时是滋养培养基，也是区别性培养基。
  • 保存及携送培养基：保存某一纯培养菌之活性及生理特性所使用的培养基，例如stock medium（库存培养基）可作为保存一般肠内杆菌，而GermBank保存装置（启新生技生产）能保存各种致病菌。
    • 临床检体的携送，必须做到其中的微生物在接种培养基前不增殖或数目减少，并使各种微生物数量维持一定的比率。因此，有些检体，尤其是病原微生物数量很低的检体，必须使用携送培养基，以达到分离的效果。
    • 例如：由咽喉、鼻腔、耳、眼、直肠、伤口等处收集的棉花拭子检体，要置于携送培养基中，常用之携送培养基包括：

Aerobic CultureSwab（含有Stuart培养基、Amies培养基、或CaryBlair培养基）系针对分离嗜氧菌而设计； Anaerobic CultureSwab或Anaerobic Transtube，培养基与Culture-Swab成分相同，但量较多，系针对分离厌氧菌而设计； Buffered glycerol-saline base系针对分离粪便中志贺氏菌（Shigella spp.）而设计； Campy-transtube系针对分离粪便中弯曲杆菌（Campylobacter spp.）而设计。[1]

可以介绍的几种培养基配方

  • 培养基是微生物的食物，每个学习微生物专业的人都会接触到。
    • 培养基的配方根据具体微生物的不同而不同，因此培养基有成千上万种，但有一些培养基却是经常用到的。以下的配方可能会对大家有帮助。（摘自生物谷）
  • 1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)--Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10g/CaCO3 20g Agar (琼脂) 15g/Distilled water (蒸馏水) 1000ml Adjust (调) pH to 6.8
    • 适用范围：恶臭醋酸杆菌混浊变种
  • 2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)--Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30g/NaCl 5g Agar (琼脂) 15g/Distilled water (蒸馏水) Adjust (调) pH to 7.0-7.2/[Note]：When cultivation of Bacillus，5mg of to MnSO4.H2O may be added ./It is favorable to promote spore formation .
    • 适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、萤光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌
  • 3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)--KH2PO4 0.2g K2HPO4 0.8g/MgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O 0.1ｇ/Ｎa2MoO4.2H2O Trace(微量) Yeast axtract(酵母膏) 0.5g/Mannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract(微量)/Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g/Adjust (调) pH to 7.2
    • 适用范围：固氮菌、胶质芽孢杆菌
  • 4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)--Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1g/Glucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml/[Note]:Boil the mixture in autoclave at 121℃ for 1 hr. distribute the medium into 18ⅹ18 mm tubes , each contains 10 ml of the liquid , then autoclave at 121℃ for 1 hr . again (15磅蒸煮1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。15磅再次灭菌15小时。)
  • 5. Lactic-bacteria Medium I (乳酸菌培养基 I )--Yeast extract (酵母膏) 7.5g Peptone (蛋白胨) 7.5g/Glucose (葡萄糖) 10g KH2PO4 2g/Tomato juice (西红柿汁) 100ml Tween (吐温) 80 0.5ml/

Distilled water (蒸馏水) 900ml pH 7.0

    • 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）、嗜热乳酸链球菌
  • 6. Lactic-bacteria Midium Ⅱ (乳酸菌培养基 Ⅱ)--Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract (蛋白胨) 10g/Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g/Tween (吐温) 80 1g K2HPO4 2g/Na-acetate (醋酸钠) 5g Diamine citrate (柠檬酸二胺) 2g/MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g/Distilled water (蒸馏水) 1000m pH 6.5-6.8
    • 适用范围：植物乳杆菌（胚芽乳杆菌）
  • 7. Peotone Glucose Yeast extract Medium PGY （蛋白胨、酵母膏、葡萄糖培养基）--Peptone（蛋白胨） 10g Yeast extract （酵母膏） 5g/Glucose （葡萄糖） 1g Distilled water （蒸馏水） 1L
  • 8. Glycerol Agar （甘油琼脂）--Peptone （蛋白胨） 5g Beef extract （酵母膏） 3g/Glycerol （甘油） 20g Top water （自来水） 1000ml/Agar （琼脂） 15g pH 7.0-7.2
  • 9. Rhizobium medium （根瘤菌培养基）AS 9--Yeast eztract （酵母膏） 1g Soil eztract （土壤浸提液） 200ml [2]

参考来源

  1. ↑ 【培养基种类】培养基可依照其应用的目的或功能，分为下列数种. Creative. [2021-09-28] （中文）. 
  2. ↑ 农民伯伯在海南. 146种培养基配方[细菌培养基和植物培养基]. 每日头条. 2019-05-06 [2021-09-28] （中文）. 
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