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组织分离
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==常用分离方法==
种菇要选朵大盖厚,柄短,八九分成熟的优良品种。切去菇两基部,在无菌箱内以0.1%的升汞水浸几分钟,再用无菌水冲洗并揩干或用75%酒精棉球擦拭菌盖与菌柄2次,进行表面消毒。
接种时,只要将种菇撕开,在萌盖和菌柄交界处或菌褶处,挑取一小块组织;移接 到PDA 到[[PDA 培养基 ]] 上。置25℃左右温度下培养3-5天,就可以看到组织上产生白色绒毛状菌丝,转管扩大即得到菌种。
如香菇、平菇等可以用此方法。
应注重的是,菌核是贮藏器官,大部分是多糖类物质,只含有少量的菌丝,因此挑取的组织块要大一些,假如组织块过小,则不易分出菌种。
其操作方法是先用酒精或升汞将菌素表面黑色皮层轻轻擦拭2~3次, 然后去掉黑色外皮层(菌鞘),抽出白色菌髓部分;用无菌剪刀将菌髓剪一小段,接种在培养基上,保温培养,即得该菌菌种。
菌素分离要注重:因菌素比较细小,分离素也比较细小,分离时极易污染杂菌,所以要严格操作。
案例
1.著名的黑木耳菌种“菊三”、“冬梅1号”、“雪梅1号”、“雪梅3号”、“984”就是黑龙江省柴河食用菌学会冬梅食用菌厂,通过对野生木耳组织分离,驯化选育成功的。
2.香菇组织分离方法
选用的子实体先经0.1%开汞水或70%酒精表面消毒后。用无菌水冲洗并用无菌纱布擦去表面水分。
分离香菇时,用无菌解剖刀自菌柄处切开少许,再用手将子实体掰开为二,在菌盖与菌褶交界处,切取0.3~0.4立方厘米的一小块菌肉,移放在斜面培养基中央。如已开伞的种菇、则选菌盖与菌柄交界处的菌肉。
分离草菇时,用无菌解剖刀把菌蕾纵切少许;再用手把菌盖轻轻剥开,在菌柄上方和菌盖交界处,切取1~5毫米的细块,接在 [[ 斜面培养基 ]] 中。如种菇已受雨淋,吸水较多,应取菌褶作为接种材料。组织分离后将试管外面放在恒温箱中培养。待组织块周围萌发出菌丝,并向 培养基蔓延生长后,再挑取生长健壮的菌丝进行转管培养。 [[ 组织分离法 ]] 操作简便,又不易带入杂菌,容易获得纯菌种。但对银耳、黑木耳等胶质菌;因其子实体中菌丝的含量极少,如用组织分离培养,则往往不易成功。 '''视频''' '''食用菌组织分离培养-庆元职高食用菌专业-食用菌专业实训系列''' [https://haokan.baidu.com/v?pd=wisenatural&vid=4270482146359716442 好看视频] ==参考文献=={{Reflist}}