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限制酶

基本內容

限制酶（Restriction Enzymes）

細菌反擊

細菌容易被噬菌體感染，如已經在每月推薦分子中看到的phix174噬菌體。許多細菌用切割外來DNA的方法進行自我保護，如切割感染性噬菌體的DNA。這些細菌產生一種能切割DNA的核酸內切酶，一旦發現外來DNA便將其切割，因此它們有效地限制了噬菌體對細菌的感染，故這種核酸內切酶被稱為限制酶。

分子剪刀

每種限制酶特異識別專一DNA序列，並在切割位點將其準確切割。例如，EcoR1切割GAATTC序列，切割位點在G與A之間。細菌將自身的DNA甲基化修飾，防止了被自身核酸內切酶降解。這些甲基化基團被裝到DNA大溝的腺嘌呤或胞嘧啶上（依細菌種類而定），使限制酶不能與DNA序列結合，但又不影響這些DNA序列上遺傳信息的正常識別與表達。噬菌體DNA沒有這些保護性的甲基化基團，所以會被降解。每種細菌都有一種或幾種用來切割特異DNA序列的限制酶，還有與限制酶配對的甲基轉移酶，用來防止限制酶降解細菌基因中的相應序列。

作用

在DNA重組技術中，限制酶主要用於：

①在特異位點上切割DNA，產生特異的限制酶片段；

②建立DNA分子的限制酶圖譜；

③構建基因文庫；

④用限制酶切出的相同的粘性末端，以便重組。