求真百科歡迎當事人提供第一手真實資料，洗刷冤屈，終結網路霸凌。

「ELISA法」修訂間的差異檢視原始碼討論檢視歷史

事實揭露 揭密真相
前往： 導覽、 搜尋
小
(1 個標籤：清空)
小 （rollbackEdits.php mass rollback）
(1 個標籤：回退)
 
(未顯示由 2 位使用者於中間所作的 2 次修訂)
行 1： 行 1：
 +
[[File:ELISA法.jpg|缩略图|[https://pic.sogou.com/d?query=ELISA法&forbidqc=&entityid=&preQuery=&rawQuery=&queryList=&st=&did=3 原图链接][http://www.detaibio.com/topics/competition-ELISA.html 来自南京泰德生物]]]
 +
'''ELISA法'''酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
  
 +
== 基本原理 ==
 +
它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。
 +
 +
在这种测定方法中有3种必要的试剂：①[[固相的抗原]]或抗体（免疫吸附剂） ②[[酶标记的抗原]]或抗体（标记物）③酶作用的底物（显色剂）
 +
 +
测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，但仍保留其免疫活性，然后加一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性，当偶联物与固相载体上的抗原（抗体）反应结合后，再加上酶的相应底物，即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。<ref>[https://www.biomart.cn/experiment/430/502/503/504/64056.htm ELISA方法的及步骤]丁香通</ref>
 +
 +
其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、[[光学显微镜]]、[[电子显微镜观察]]，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定。其方法简单，方便迅速，特异性强。
 +
 +
== 分类 ==
 +
该法由种类和变化可分为以下几种：
 +
 +
（一）双抗体夹心法
 +
 +
（二）间接法
 +
 +
（三）竞争法
 +
 +
（四）双位点一步法
 +
 +
（五）捕获法测IgM抗体
 +
 +
（六）应用亲和素和生物素的ELISA
 +
 +
== 特点 ==
 +
该法相较其他方法而言，有几大特点
 +
 +
灵敏性高
 +
该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知, 酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位，或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。<ref>[https://zhuanlan.zhihu.com/p/90628786 关于ELISA实验的一些原理总结]知乎</ref>
 +
 +
特异性强
 +
其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系，所以抗原抗体反应具有高度的特异性。
 +
 +
== 总述 ==
 +
酶联免疫吸附测定法
 +
 +
1971年瑞典学者[[Engvail和Perlmann]],荷兰学者[[Van Weerman]]和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即[[酶联免疫吸附测定法]] (enzyme-linked immuno sorbent assay , ELISA) 。ELISA已成为分析化学领域中的前沿课题 ，它是一种特殊的试剂分析方法，是在[[免疫酶技术]]( immunoenzymatic techniques ) 的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。
 +
 +
==参考文献==
 +
{{reflist}}
 +
[[Category:360 生物科學總論]]

於 2022年8月25日 (四) 09:32 的最新修訂

原圖鏈接來自南京泰德生物

ELISA法酶聯免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用於檢測大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易於標準化等優點。

基本原理

它採用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接，然後通過酶與底物產生顏色反應，用於定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。

在這種測定方法中有3種必要的試劑：①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑） ②酶標記的抗原或抗體（標記物）③酶作用的底物（顯色劑）

測量時，抗原（抗體）先結合在固相載體上，但仍保留其免疫活性，然後加一種抗體（抗原）與酶結合成的偶聯物（標記物），此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性，當偶聯物與固相載體上的抗原（抗體）反應結合後，再加上酶的相應底物，即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。[1]

其所生成的顏色深淺與欲測的抗原（抗體）含量成正比。 這種有色產物可用肉眼、光學顯微鏡、電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計（酶標儀）加以測定。其方法簡單，方便迅速，特異性強。

分類

該法由種類和變化可分為以下幾種：

（一）雙抗體夾心法

（二）間接法

（三）競爭法

（四）雙位點一步法

（五）捕獲法測IgM抗體

（六）應用親和素和生物素的ELISA

特點

該法相較其他方法而言，有幾大特點

靈敏性高 該測定法的靈敏度來自作為報告基團的酶。眾所周知, 酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產生可供觀察的顯色反應現象。因此該體系常被稱為酶放大體系。ELISA實現了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。[2]

特異性強 其特異性來自抗體或抗原的選擇性。抗原抗體的結合實質上只發生在抗原的抗原決定簇與抗體的抗原結合位點之間。由於兩者在化學結構和空間構型上呈互補關係，所以抗原抗體反應具有高度的特異性。

總述

酶聯免疫吸附測定法

1971年瑞典學者Engvail和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法，即酶聯免疫吸附測定法 (enzyme-linked immuno sorbent assay , ELISA) 。ELISA已成為分析化學領域中的前沿課題 ，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術( immunoenzymatic techniques ) 的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術 。

參考文獻

  1. ↑ ELISA方法的及步驟丁香通
  2. ↑ 關於ELISA實驗的一些原理總結知乎
取自 "https://factpedia.org/index.php?title=ELISA法&oldid=4611337"