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血平板培养基

血平板培养基,通用名称是血琼脂平板培养基,用于链球菌、金黄色葡萄球菌及其他苛氧菌的分离、培养及溶血活性的检测。

基本信息

中文名称; 血平板培养基

外文名称; Blood Agar

通用名称; 血琼脂平板培养基

要求; 量在抗菌药物使用前采集标本

培养基

通用名称:血琼脂平板

培养基

商品名称:血平板培养基

英文名称:Blood Agar

血平板培养基又叫做血平板、血琼脂平板培养基,主要用于链球菌及其他苛养菌的分离、培养及溶血活性的检测。可用于临床标本的分离、培养 。

检验原理

其中的蛋白胨和牛肉粉主要提供细菌生长所需要的碳源、氮源、氨基酸及维生素。氯化钠维持培养基中的渗透压,琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血一方面提供一些特殊的生长因子,另一方面用于观察溶血反应。

样本要求

1、尽量在抗菌药物使用前采集标本。

2、标本采集时应严格执行无菌操作,减少或者避免机体正常菌群及其他杂菌污染。

3、标本采集后应立即送至实验室,床边接种可提高病原菌检出率。

4、以棉拭子采集的标本如咽拭、肛拭或伤口拭子,宜采用插入运送培养基送检。

5、混有正常菌群的标本如咳痰、尿液、伤口拭子,不可置肉汤培养基内送检。

6、盛标本容器须经灭菌处理,但不得使用消毒剂。

7、送检标本应注明来源和检验目的,使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。

检验方法

1、复温:取出培养基复温至室温;

2、接种:将取好的标本或菌株,采用划线、涂布或者其他方法接种于培养基;

3、培养:将接种好的培养基作好标识,置于37±2℃培养箱中避光培养18~24小时,观察结果;临床标本应置于含有3~10%CO2的培养箱中培养18~24小时,观察结果。

检验结果

1、溶血性链球菌通常呈现透明或半透明的灰白色小菌落(直径1mm左右),或是较大的、粗糙的、黏液样菌落(直径2~4mm)。菌落周围环绕这溶血环,α-溶血的链球菌呈现半透明草绿色溶血环,β-溶血的链球菌呈现透明溶血环。为了确认是否为链球菌,还应进行革兰氏染色观察,因为一些非链球菌也可在血平板培养基上形成溶血环(如大肠杆菌、铜绿假单胞菌、李斯特氏菌和溶血性葡萄球菌等)。血平板培养基上溶血性链球菌的菌落数量对临床诊断有一定参考价值。

2、葡萄球菌通常呈现不透明的白色或金黄色菌落,周围环绕透明溶血环(β-溶血)或没有溶血环。

3、李斯特氏菌可产生较小的β-溶血环,但是可通过革兰氏染色和动力试验与链球菌区分。

4、血平板培养基为非选择性培养基,大多数非苛养菌都可生长。

局限性

由于血平板培养基采用的是脱纤维羊血,其中缺乏嘧啶核苷酸,不支持流感嗜血杆菌及某些奈瑟氏菌的生长。 注意事项 1、使用前如发现平板内培养基已经干裂或染菌,请勿使用。

2、用于细菌纯化、接种或计数时,请在洁净的环境下操作,避免杂菌干扰。

3、开封后未使用完的培养基要及时放到冰箱冷藏储存,避免干裂。

4、在冰箱储存较久的培养基容易出现较多的冷凝水,请在洁净环境下将水倾出,然后在培养箱放置一段时间,待其表面干燥之后再接种。

5、弃物处理:使用后应焚烧或高压灭菌后按一般垃圾处理。

6、仅用于体外诊断。

7、仅用于专业人员。

8、本培养基含有动物来源的产品,产品和动物均已经过检验,但是不能保证无致病因子存在,应与潜在感染物同等对待本产品,采取正常安全措施处理本产品(不要肌肤接触或摄入)。

常用培养基

1、哥伦比亚血琼脂+5%绵羊血(Columbia agar + 5% sheep blood)

用途:用于分离难养细菌(fastidious bacteria)并鉴定溶血特性

简介:哥伦比亚培养基是专为营养要求苛刻的微生物而设计的分离培养基,添加羊血后,其丰富的营养可以供绝大多数的具有不同代谢类型的微生物生长。

2、哥伦比亚CNA琼脂+5%绵羊血(Columbia CNA agar + 5% sheep blood)

用途:用于分离难养细菌并鉴定溶血特性的选择性培养基

简介:哥伦比亚CNA琼脂用于选择性培养临床样本中遇到的绝大多数革兰氏阳性细菌,培养基中所包含的萘啶酸(nalidixic acid)和柯利霉素(colimycin )将抑制绝大多数的革兰氏阴性菌和芽孢杆菌的生长。

3、哥伦比亚血琼脂+5%马血(Columbia agar + 5% horse blood)

用途:用于分离难养细菌并鉴定溶血特性

简介:哥伦比亚马血培养基常用于分离培养对营养要求苛刻的微生物。

4、胰酶大豆琼脂+5%绵羊血(Trypcase Soy Agar + 5% sheep blood)

用途:用于分离细菌并鉴定溶血特性

简介:TSA绵羊血培养基适用于分离临床常见的多种微生物。

5、巧克力培养基+复合纤维素X(Chocolate agar + PolyViteX)

用途:用于分离难养细菌

简介:添加复合维生素X(PVX)的巧克力琼脂常用于分离对营养要求较高的细菌,尤其是针对临床样本中的奈瑟氏菌属(Neisseria)、嗜血杆菌(Haemophilus)、肺炎双球菌(Streptococcuspneumoniae)有较好的分离效果。该培养基中富含由血红蛋白提供的X因子(factors X;血晶素 hemin)和由复合维生素提供的V因子(NAD),该培养基常用于已纯化菌株的继代培养。

6、巧克力琼脂+复合纤维素X VCAT3 琼脂(Chocolate agar + PolyViteX VCAT3 agar)

用途:选择性分离淋病奈瑟氏菌和脑炎奈瑟氏菌

简介:该培养基中添加的特殊抗生素和抗真菌剂可以实现选择性分离复杂临床样本中的淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)和脑炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitidis)。

7、嗜血杆菌巧克力琼脂(Haemophilus Chocolate 2 agar)

用途:选择性分离培养嗜血杆菌

简介:由于人的临床样本中常含有大量的其他种类的细菌,因此对嗜血杆菌的分离造成了很大困难,而该培养基由于含有选择性的抗生素和抗真菌素因此适合用于分离复杂样本中的嗜血杆菌。[1]

参考文献

  1. 什么是血平板培养基, 360问答 ,2013.06.06