藻紅蛋白檢視原始碼討論檢視歷史

藻紅蛋白(P-phycoerythrin,PE)是從紅藻中分離純化的，目前普遍使用地新型熒光標記試劑。在特定波長激發下，藻膽蛋白能發射強烈的熒光，其熒光強度是熒光素的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子產率，在可見光譜區有很寬的激發及發射範圍。

簡介

用常規的標記方法可以很方便地將其與生物素、親和素和各種單克隆抗體結合起來製成熒光探針，用於免疫檢測、熒光顯微技術和流式細胞熒光測定等臨床診斷及生物工程技術。

優點

將藻膽蛋白用於熒光分析，具有傳統化學熒光染料無法比擬的優越性：

1、在較寬的PH範圍內具有較寬的吸收光譜，比較容易選擇合適的激發波長，從而得到高效熒光發射，且激發時有特異的熒光發射峰；

2、吸光度和熒光量子產率很高，熒光強而穩定，靈敏度高；

3、具有較小的熒光背景，不易淬滅，熒光保存期較長；

4、水溶性極佳，易於其他分子交聯結合，非特異性吸附少；

5、純天然海洋生物提取，無任何毒副作用，不含放射性，操作使用非常安全。

易與抗體、生物素、親合素、免疫蛋白等物質結合，製成熒光探針。通過檢測其發出的熒光，可以用於熒光顯微檢測、熒光免疫測定、雙色或多色熒光分析、癌細胞表面抗原檢測、蛋白質和核酸等生物大分子的分析。用於免疫檢測、熒光顯微技術和流式細胞熒光測定等臨床診斷及生物工程技術。

結構: 分子結構為通過硫醚鍵連接的載體蛋白與開鏈線性延展的四咯化合物。

分子量: 240,000 道爾頓

組成: 蛋白的亞基組成為(alpha-beta)6gamma 。 每個alpha-亞基和beta-亞基約 20,000 道爾頓， 每個gamma亞基約30,000道爾頓。

藻紅蛋白原圖鏈接

最大吸收峰: 565±5 nm

熒光發射峰: 578±5 nm

穩定性：4ºC可穩定保存1年。勿冷凍。

光敏作用

藻紅蛋白具有光敏作用，是海洋藻類中重要的捕光色素蛋白之一，也是新型的高效光敏劑。經適宜波長的光激發後可以產生單線態氧及其它的氧自由基，殺傷生物大分子。腫瘤光動力治療是以此為基礎而發展起來的很有前景的腫瘤治療新手段.儘管新型的光敏藥物在不斷的湧現，包括：鋁酞菁、C60等，但目前常用的光敏藥物主要來自全血中分離的血葉琳衍生物，它們不僅價格昂貴，而且毒副作用大，有嚴重的皮膚光毒反應.接受以血葉琳衍生物作光敏劑的光動力治療的病人至少要避光兩周到一個月，以防止皮膚受到光毒性的破壞。因而，限制了腫瘤光動力治療的廣泛應用.其它的光敏藥物，目前尚處在探討階段。有研究表明藻紅蛋白是一種新型的高效、無毒副作用的光敏藥物，可望開發為有實用價值的新型光動力藥物。我們動態觀察了藻紅蛋白與腫瘤細胞的相互結合過程，為藻紅蛋藻紅蛋白與細胞結合主要發生在三個結構層次，即細胞膜，胞漿和胞核。PE首先與細胞膜結合，形成明顯的環狀熒光；隨着與細胞作用時間的延長，逐漸進入細胞漿及核內.有時甚至可以觀察到核內清晰的核仁。已有資料證明，PE在經過激光激發後可以產生單線態氧及其它的氧自由基產物。這些活性氧組份具有破壞包括蛋白質和核酸等在內的生物大分子的作用。藻紅蛋白的激光光敏殺傷腫瘤細胞可能在細胞水平的三個層次上發揮

作用

1) 藻紅蛋白結合於腫瘤細胞膜或游離於膜外，光敏反應發生時，產物可攻擊膜蛋白和不飽和脂質，引起膜蛋白光氧化，損傷膜結構；

2) 位於胞漿內，光輻照產生的單線態氧等自由基對胞漿內酶和核酸進行攻擊，影響細胞內生化反應，破壞RNA的結構.作用於線粒體，破壞生物氧化鏈等；

3) 作用於細胞核內的DNA，阻礙細胞周期的進行，啟動細胞凋亡。

藻紅蛋白原圖鏈接

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