H7N9疫苗
H7N9疫苗 |
H7N9型禽流感是一種新型禽流感,於2013年3月底在上海和安徽兩地率先發現,而在2017年1月再次發生H7N9型禽流感疫情。H7N9疫苗研製嘗試把H7N9的主要致病基因植入
到成熟的疫苗載體上,更加有效的激發人體產生免疫應答。未來,H7N9禽流感疫苗將在活禽和養殖場工作人員、家庭主婦等高危人群中推廣接種。
中文名H7N9疫苗
類 型疫苗流感爆發時間2013年4月研製進程完成抗體篩選,正式進入臨床試驗
一、 簡介
截至2017年,已有多個H7N9疫苗備選株通過了WHO安全性評價,可用於疫苗研發。在此基礎上, H7N9滅活疫苗、減毒活疫苗以及重組疫苗
均已取得較好的研究結果。部分藥企也先後提交疫苗臨床試驗申請,H7N9疫苗的研製工作目前進度不一。
二、難題
H7N9禽流感病毒感染早期若使用常見抗病毒藥物進行干預,能有效降低併發症的發生率,減少感染者死亡。但已有研究顯示,新型H7N9禽流感病毒已對目前使用
的如金剛烷胺、扎那米韋、奧司他韋、帕拉米韋等抗病毒藥物產生了抗性。有的 H7N9禽流感病毒甚至有對扎那米韋和奧司他韋的雙重抗性。這使得H7N9禽流感病毒感染的治療具有時限性,且變得困難。
對於外界關注度很高的H7N9流感疫苗的問題,國家衛計委表示,目前並沒有預防H7N9病毒感染的疫苗可用。
三、研究進展
疫苗備選毒株的選育 獲得疫苗備選株是疫苗研發的第一步。自2013年H7N9禽流感病毒感染人以來,已有很多研究機構按照WHO的要求進行H7N9禽流感病毒
疫苗備選株的選育。世界多地雖已分離出多個H7N9禽流感毒株,但均與首次分離得到的A/Shanghai/2/2013 和 A/Anhui/1 / 2013株同源。因此,
WHO推薦使用這兩個毒株作為母本株選育疫苗株。美國CDC的Callie Ridenour等採用反向遺傳重配技術重配A/Puerto Rico/8/34(H1N1)和 A /Shanghai/2/2013
(H7N9)毒株,得到了IDCDCRG- 32A 和IDCDC-RG32A.3。日本國立傳染病研究所 (NationalInstituteofInfectiousDiseases, NIID)的 NAKAMURA等
使用A/Puerto Rico/8/34(H1N1) 和A/Anhui/1/2013(H7N9)毒株,以6:2的形式進行反向遺傳重配, 得到了3個不同的病毒NIIDRG-10、 NIIDRG-10.1和NIIDRG-10.2,
通過對病毒抗原性、免疫原性、雞胚高產性等一系列分析比較後,獲得疫苗備選株NIIDRG-10.1。另外的一些疫苗備選株是由美國FDA或英國NIBSC重配得到的。
CHIA等使用 H7N9疫苗株NIBRG-268在MDCK細胞上進行連續傳代,獲得可在MDCK細胞上高產的H7N9禽流感病毒疫苗株。WODAL等 使用Vero細胞對H7N9A/Anhui/1/2013virus進行培養,用於製備人用H7N9禽流感疫苗全病毒滅活疫苗。
2 動物實驗 目前已有H7N9全病毒滅活苗、 H7N9裂解疫 苗、 H7N9減毒活疫苗以及H7N9重組疫苗進行了動 物實驗。
2.1 H7N9滅活疫苗動物實驗 CHIA等及 WONG等的H7N9禽流感全病毒滅活疫苗的雪貂實驗結果顯示,在無佐劑的情況下,單純H7N9全病毒滅活疫苗只能激起雪貂機體內較低水平的體液免疫反應,
當H7N9野毒株攻毒時,疫苗僅能保護雪貂免於死亡,不能使雪貂免於野毒株感染, 雪貂依舊會出現與對照組相似的臨床症狀。與此結果相似的是, WODAL等使用H7N9禽流感全
病毒滅活苗免疫小鼠及豚鼠後發現,疫苗能引起實驗動物的體液免疫,產生抗HA和抗NA抗體,疫苗對免疫後小鼠和豚鼠的保護效果與接種劑量成正相關。此外,
DUAN等用含佐劑的H7N9裂解疫苗 免疫小鼠,結果疫苗能對實驗動物產生良好的免疫保護,激起實驗動物體內體液免疫及細胞免疫,產生較平衡的Th1和Th2型免疫反應。 總體來看,
在H7N9禽流感滅活苗(全病毒滅活苗和裂解疫苗)中加入佐劑是提高其免疫效果的有效手段,開發能夠滿足H7N9疫苗使用的佐劑對於疫苗研發具有重要意義,目前對佐劑MF59、 AS03的研究較多,且已進入臨床階段。
2.2 H7N9減毒活疫苗動物實驗 流感減毒活疫苗具有比滅活疫苗更好的免疫保護效果。減毒活疫苗能夠激起機體內體液免疫及黏膜免疫,同時還能激起較好的細胞免疫。
季節性流感減毒活疫苗生產時,使用具有冷適應性的母本毒株與流行株進行重配,獲得季節性流感減毒活疫苗備選株。由此啟發, DEJONGE等的研究小組將A/Leningrad/134/ 17/57(H2N2)
與H7N9A/17/Anhui/2013/61重配製成減毒活疫苗,並進行雪貂實驗,結果顯示,接種 1至2劑減毒活疫苗後,雪貂能產生較好的體液免疫 和細胞免疫,能夠抑制野毒株在其體內複製。
YANG 等和KONG等的研究小組使用A/AnnArbor/ 6/60(H2N2)與A/Anhui/01/2013(H7N9)製得減毒活疫苗 ,雪貂實驗結果與DEJONGE等的研究結果一致。 由此看出,
人用H7N9禽流感減毒活疫苗在動物模型上較滅活疫苗有效,不需佐劑即能有效激起 體液免疫、細胞免疫及黏膜免疫,保護免疫動物不受感染, 具有進一步進行臨床研究的價值。
2.3 H7N9重組疫苗動物實驗 為了更快地生產出大量抗原製成疫苗,防控相關疾病,重組疫苗的研 發成為熱點。美國FDA在2013年批准了三價季節性流感重組疫苗(FluBlock)上市。
該疫苗被證明應用於成年人是安全的,且免疫效果較傳統疫苗好。 因此,研究人員也開始研發人用H7N9禽流感疫苗 重組疫苗,主要為全長HA重組疫苗(rHA)和 加 入了病毒M、
NP等蛋白的VLPs疫苗。在H7N9rHA疫 苗研究初期發現, 與季節性流感重組疫苗相比,單純H7N9rHA疫苗對動物模型的保護效果較差。 CAO等使用腺病毒表達載體製備出H7N9(A/ Anhui/1/2013)
rHA疫苗, 加入核酸佐剂后,能有效激起小鼠体内体液免疫和细胞免疫,对 H7N9野毒株产生抵抗力,较好地保护BALB/c小鼠。类似的结果在YANG等的研究中得到了证实。
LIU等純化出具有較高血凝抑制滴度的H7N9VLPs(含M、 NP蛋白),以其免疫雪貂,使用同源毒株A/Anhui/ 1/2013(H7N9)感染雪貂時發現,免疫組雪貂與對照組相比,
基本未出現H7N9感染的臨床症狀, 雪貂體內的病毒複製得到了抑制,肺部和氣管也未受到病毒感染。SMITH等的研究結果還顯示, 加入佐劑的重組H7N9VLPs免疫動物,
還能對A(H7N3)產 生交叉保護。 重組疫苗在動物模型上的研發成功,預示了重 組疫苗用於人體免疫的可行性。
3.人用H7N9禽流感疫苗臨床研究進展 人用H7N9禽流感疫苗研發已成為目前研究的熱點。葛蘭素史克、諾華等疫苗公司以及美國過敏症病研究所
(NationalInstituteofAllergyand InfectiousDiseases, NIAID)等機構已申請了人用H7N9 禽流感疫苗的臨床試驗。諾華公司率先完成了H7N9VLPs疫苗一期臨床劑量研究,
同時也完成了H7N9VLPs疫苗佐劑Matrix-M1TM的臨床一期、 二期研究。葛蘭素史克公司則完成了其疫苗在18-64歲人群中免疫原性及安全性臨床一期試驗。
進入一期臨床試驗的受試者使用的H7N9禽流 感減毒活疫苗由俄羅斯RUDENKO等的研發小組研發, 在18-49歲人群中完成了臨床一期試驗。 在一期臨床試驗中,
免疫組發生不良反應的概率與安慰劑組無差異,疫苗中的減毒活毒不會從疫苗接種人群傳至未接種人群,證明疫苗具有較高的安全 性。該減毒活疫苗第1劑免疫後血清抗體陽轉率可達48%,
第 2 劑免疫後血清抗體陽轉率可達93%。大部分受試者在接受兩劑免疫後,其體內病毒特異的 CD4+細胞比例明顯增加, 預示受試者可能對H7N9野毒株具有抵抗力。
另一些進入臨床研究的是針對疫苗中添加的 佐劑成分。AS03 和MF59佐劑均能提高H7N9滅活疫苗的免疫保護率,引起機體相應的體液免疫和細胞免疫,但兩者進行比較發現,
AS03的效果优于MF59, AS03能够使 机体获得更好的交叉免疫保护。新型免疫佐剂 Matrix-MTM 也被应用于H7N9疫苗的研究中。前期 Matrix-MTM H5N1疫苗临床试验证明,
其能引起機體 產生同源或異源性抗體,同時能介導機體產生Th1 型細胞免疫反應。Matrix-MTM 是H7N9疫苗開發 過程中較有研究前景的佐劑。
四、最新報道
2017年2月15日晚間,天壇生物對外宣布其H7N9流感疫苗獲得臨床試驗批件。此外,華蘭生物的H7N9流感疫苗已經完成I期臨床試驗,進入II期臨床籌備階段;科興生物也已提交了H7N9疫苗的臨床試驗申請。
五、展望 語音
截至目前,H7N9禽流感病毒感染人的病例仍以散發形式存在。H7N9禽流感病毒雖還不能人傳人,卻是一個潛在的大流行流感病毒人用H7N9禽流感疫苗的研發刻不容緩。
目前已有H7N9禽流感 病毒滅活疫苗、 減毒活疫苗、重組疫苗完成了一期或二期臨床研究,但距離疫苗投產尚有一段距離。 新型重組疫苗在臨床試驗中表現出較好的免疫保護效果,
但其生產過程中使用了腺病毒表達系統,長期多次使用可能對接種者造成不可預估的影響。 現階段研發的人用H7N9禽流感經典疫苗,除減毒活疫苗外,均需加入佐劑才能更好地激起機體的免疫反應。
因此,開發能夠滿足H7N9疫苗研發需要的佐劑至關重要。目前已用於臨床試驗的佐劑有鋁佐劑、 ASO3、 MF59。新型佐劑Matrix-MTM正在申請臨床研究。Toll樣受體、
核酸佐劑已應用於其 他研究領域,可嘗試應用於人用H7N9禽流感疫苗的研發。 此外,用於研發的人用H7N9禽流感疫苗株仍是雞胚依賴型。考慮到雞胚培養流感病毒的局限性,
基於細胞培養的,尤其是基於WHO推薦的能用於疫苗生產的Vero細胞培養,且能在Vero細胞上進行連續
傳代的H7N9禽流感病毒疫苗備選株的開發,在H7N9大流行流感疫苗的研發中具有重要意義。 [1]