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胶原纤维 |
胶原纤维 |
中文名称 :胶原纤维 属 于 :真皮 属 性 :蛋白质一类 营养成分 :胶原蛋白,氨基酸等 |
胶原纤维是主要含有胶原蛋白,氨基酸有甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内,在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。胶原纤维是真皮中的主要成分,占真皮全部纤维质量的95%-98%.新鲜的胶原纤维呈白色,故又称白纤维。在HE染色标本中,胶原纤维被染成粉红色,较粗大,直径0.5-20um,成束分布,排列紧密,交织成网。[1]
结构
Ⅰ型胶原的原纤维平行排列成较粗大的束,成为光镜下可见的胶原纤维,抗张强度超过钢筋。其三股螺旋由二条α1(Ⅰ)链及一条α2(Ⅰ)链构成。每条α链约含1050个氨基酸残基,由重复的Gly-X-Y序列构成。X常为Pro(脯氨酸),Y常为羟脯氨酸或羟赖氨酸残基。重复的Gly-X-Y序列使α链卷曲为左手螺旋,每圈含3个氨基酸残基。三股这样的螺旋再相互盘绕成右手超螺旋,即原胶原。原胶原分子间通过侧向共价交联,相互呈阶梯式有序排列聚合成直径50~200nm、长150nm至数微米的原纤维,在电镜下可见间隔67nm的横纹。胶原原纤维中的交联键是由侧向相邻的赖氨酸或羟赖氨酸残基氧化后所产生的两个醛基间进行缩合而形成的。原胶原共价交联后成为具有抗张强度的不溶性胶原。胚胎及新生儿的胶原因缺乏分子间的交联而易于抽提。随年龄增长,交联日益增多,皮肤、血管及各种组织变得僵硬,成为老化的一个重要特征。人α1(Ⅰ)链的基因含51个外显子,因而基因转录后的拼接十分复杂。翻译出的肽链称为前α链,其两端各具有一段不含Gly-X-Y序列的前肽。三条前α链的C端前肽借二硫键形成链间交联,使三条前α链"对齐"排列。然后从C端向N端形成三股螺旋结构。前肽部分则呈非螺旋卷曲。带有前肽的三股螺旋胶原分子称为前胶原(procollagen)。胶原变性后不能自然复性重新形成三股螺旋结构,原因是成熟胶原分子的肽链不含前肽,故而不能再进行"对齐"排列。
胶原蛋白的提纯
探索一个简要的胶原提纯方法,比较提取不同来源的胶原蛋白的物理化学特性,利用影像法探讨胶原纤维体外生长聚合三维构建过程和特征,为生物医学工程的生物材料设计和组织工程替代治疗提供基础。方法:利用乙酸法和酶的降解法提取猪脚关节韧带、大鼠尾的胶原蛋白,用光学显微镜定量化分析纤维聚集动力学以及结构特性,包括纤维密度、方向性融合。结果:组织和细胞中Ⅰ型胶原蛋白单分子是120kD,Ⅰ型胶原α1(Ⅰ)以及α2链表达在120、116kD,Ⅰ型胶原蛋白基质行成的胶原纤维状。结论:应用该修饰方法可提出并纯化到纯的胶原蛋白。第一次报道胶原基质成分在体外可形成三维结构并用黑白视野观察纤维形成特征;阳离子钾、钠、温度及pH影响纤维的强度和胶原的集结时间。
胶原蛋白的染色
胶原纤维在HE染色法被染成粉红色,除此之外,它还可以用一些阴离子的染料来进行染色,如用淡绿可把它们染为绿色,用甲苯胺蓝可将其染为蓝色,在网状纤维染色中,如不加以处理,它又可被染为棕黄色。常用的特殊染色法有Van Gieson.Masson和Mallory等方法。在免疫细胞化学染色中,胶原纤维由于含的负电荷过多,常导致某些非特异性的染色,应特别注意。[2]
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