求真百科欢迎当事人提供第一手真实资料,洗刷冤屈,终结网路霸凌。

补体结合试验查看源代码讨论查看历史

事实揭露 揭密真相
跳转至: 导航搜索

补体的测定包括测定补体总量、溶血活性、单个补体成份和补体片段量以及补体参与试验等。利用抗原抗体复合物同补体结合,把含有已知浓度的补体反应液中的补体消耗掉使浓度减低的现象,以检出抗原或抗体的试验,为高敏度检出方法之一,特别是根据抗原物质的特性,抗原抗体反应不能用沉淀反应或凝集反应观察时也可以利用此法。

临床意义

异常结果:>1∶10为阳性,诊断布氏杆菌病符合率为97.96%。

补体结合试验可应用在以下几方面:

①传染病诊断。病原性抗原及相应抗体的检测。

②其他抗原的检测。例如肿瘤相关抗原血迹中的蛋白质鉴定HLA分型等。

③自身抗体检测。

正常值

正常值:0~1∶10。

注意事项

操作应仔细准确;玻璃器材必须非常清洁;参与试验的各项已知成分必须预先滴定其效价,配制成规定的浓度使用,才能保证结果可靠。[1]

检查过程

(1)血素的滴定:

①取补体1ml,加BBS9ml,依次稀释成1∶20,1∶30,1∶40,1∶50,1∶60,1∶80,1∶100,1∶200,1∶400,同时取50%的溶血素0.2ml,加BBS9.8ml,即为1∶100的溶血素,然后继续稀释成1∶800,1∶1600,1∶3200,1∶6400。

②采取方阵排列试管,纵行各管加不同浓度的补体0.1ml,横排各管加溶血素0.1ml(皆应从最高稀释度加起)混匀后,各管加BBS 0.2ml,补体和溶血素对照管各加BBS 0.3ml,最后在各管中加2%羊红细胞0.1ml。各管总量为0.5ml,摇匀,放37℃水箱中30min,观察结果。

以完全溶血的补体和溶血素最高稀释度为各自的单位。在实际应用时,溶血素用2U(3200÷2=1600),补体用2.5U(80÷2.5=32)。

(2)正式试验:

①用V型微量反应板操作,每份标本作一个试验孔。一个血清对照孔。各孔内先加BBS 0.025ml。

②用稀释棒蘸取血清(0.025ml)加入第一孔,旋转后移入第二孔,共八孔,如此可得1∶2~1∶256稀释。

以小量法测定抗体的补体结合试验为例。逐步加入各种试剂,温育后先观察各类对照管,应与预期的结果吻合。阴性、阳性对照管中应分别为明确的溶血与不溶血;抗体或抗原对照管、待检血清对照管、阳性和阴性对照的对照管都应完全溶血。绵羊红细胞对照管不应出现自发性溶血。补体对照管应呈现2U为全溶,1U为全溶略带有少许红细胞,0.5U应不溶。如0.5U补体对照出现全溶表明补体用量过多;如2U对照管不出现溶血,说明补体用量不够,对结果都有影响,应重复进行试验。补体结合试验结果,受检血清不溶血为阳性,溶血为阴性。[2]

不适宜人群

无检查适应症者不宜做此项检查。

不良反应与风险

一般无并发症和危害。

参考文献