異源雙鏈DNA檢視原始碼討論檢視歷史

         

異源雙鏈DNA

[1]來自 搜狗 的圖片

異源雙鏈DNA（Heteroduplex (hybrid) DNA）是由不同親本雙鏈分子中的互補單鏈產生鹼基配對的雙鏈DNA，在遺傳重組中產生。

應用

DNA錯配修復(mismatch repair,MMR)功能缺失是確認的腫瘤發病機制之一。隨着研究的深入以及臨床診斷治療的要求,有必要從整體上對腫瘤的錯配修復功能狀態作出評價。

以M13mp2噬菌體及其衍生株和E.coli大腸桿菌為材料,以lacZa為報告基因,構建含有錯配鹼基的異源雙鏈DNA分子。

提取錯配修復功能完整細胞株(TK6)和錯配修復功能缺陷細胞株(Lovo)的全細胞蛋白,經大T抗原依賴性SV-40DNA複製檢測,證實其生物學功能保持完整後與構建成功的異源雙鏈DNA分子共同作用,發現TK6對雙鹼基缺失del(2)的修復效率超過60%,對單鹼基錯配的修復效率超過50%;而Lovo對雙鹼基缺失del(2)的修復效率低於20%,對單鹼基錯配的修復效率低於10%。

以異源雙鏈DNA為待修復模板,以細胞株TK6和Lovo分別作為MMR功能完善和缺陷表型的參照,建立體外錯配修復功能分析模型。應用該模型檢測1例具有微衛星不穩定性表型的HNPCC病人腫瘤組織,發現其MMR功能喪失；而檢測1例微衛星穩定的散發性直腸癌病人腫瘤組織,發現其具有MMR功能。

結果表明該模型可用於體外檢測各種腫瘤細胞和/或組織的錯配修復功能。為腫瘤發病機制的研究提供了可靠的方法,對進一步了解錯配修復功能狀態在各種類型腫瘤中的作用有非常重要的意義。