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離心分離

離心分離,藉助於離心力,使比重不同的物質進行分離的方法。 由於離心機等設備可產生相當高的角速度,使離心力遠大於重力,於是溶液中的懸浮物便易於沉澱析出:又由於比重不同的物質所受到的離心力不同,從而沉降速度不同,能使比重不同的物質達到分離。離心分離生物分子是最常用的生化分離方法,因為不同的生物分子有不同的體積和密度,可在不同離心力的作用下沉降分離。隨着生命科學技術的發展,離心分離技術已成為生物化學分子生物學中不可缺少的分離技術手段。

對於兩相密度相差較小,黏度較大,顆粒粒度較細的非均相體系,在重力場中分離需要很長時間,甚至不能完全分離。若改用離心分離,由於轉鼓高速旋轉產生的離心力遠遠大於重力,可大大提高沉降速率,因此離心分離只需較短的時間即能獲得大於重力沉降的效果。[1]

基本介紹

離心力:

是一種慣性力。[2]

當物體在做非直線運動時(非牛頓環境,例如:圓周運動或轉彎運動),因物體一定有本身的質量存在,質量造成的慣性會強迫物體繼續朝着運動軌跡的切線方向(原來那一瞬間前進的直線方向)前進,而非順着接下來轉彎過去的方向走。

若這個在做非直線運動的物體(例如:車)上有乘客的話,乘客由於同樣隨着車子做轉彎運動,會受到車子向乘客提供的向心力,但是若以乘客為參照系,由於該參照係為非慣性系,他會受到與他相對靜止的車子給他的一個指向圓心的向心力作用,但同時他也會給車子一個反向等大,由圓心指向外的力,就好像沒有車子他就要被甩出去一樣,這個力就是所謂的離心力。

由於處於非慣性系中,此狀況下物體所感受的力並非真實,所以有些說法會稱這種現象為"離心力"。)

離心分離的基本原理

當非均相體系圍繞一中心軸做旋轉運動時,運動物體會受到離心力的作用,旋轉速率越高,運動物體所受到的離心力越大。在相同的轉速下,容器中不同大小密度的物質會以不同的速率沉降。如果顆粒密度大於液體密度,則顆粒將沿離心力的方向而逐漸遠離中心軸。經過一段時間的離心操作,就可以實現密度不同物質的有效分離。

離心方法

根據離心方式的不同,可分為差速離心法和密度梯度離心等。

(1)差速離心:又叫分級離心法,是生化分離中最為常用的離心分離方法。它指採用低速和高速兩種離心方式交替使用,用不同強度的離心力使具有不同密度的物質分級分離的方法。離心後把上清液與沉澱分開,然後再將上清液加高轉速離心,分離出第二部分沉澱,如此往復加高轉速,逐級分離出所需要的物質。

(2)密度梯度離心:也叫區帶離心,即離心是在具有連續密度梯度的介質中進行。將試樣鋪放在一個密度變化範圍較小、梯度斜度變化比較平緩的密度梯度介質表面,在離心力場作用下試樣中的顆粒按照各自的沉降速率移動到梯度介質中的不同位置,而形成一系列試樣組分區帶,使不同沉降速率的顆粒得以分離。

分類

固一固分離

使固體之間相互分離的離心分離法稱離心分級,設備為離心分離機。用控制離心時間的辦法,使得溶液中只沉澱大顆粒,而不是所有顆粒,這樣就可逐次將顆粒按大小分開。

液一液分離

不互溶的液體在離心機中因密度不同而很快分離。這種方法比重力分離時間要短得多。常用一種稱為離心萃取機的裝置來分離液體溶液組分。該裝置由放置在圓筒轉鼓中的一系列多孔同心環組成,轉鼓環繞着一個筒形軸以每分鐘2 0005 000轉的速度旋轉,液體通過筒形軸進出,以徑向順流方式在轉筒中流動而達到液體溶液組分的分離。

氣一氣分離

同位素研究中常用的手段。在高速旋轉下,氣體狀態的同位素混合物得以相互分離。用離心分離濃縮235U是有前景的方法之一。

固一液分離

常量分析中常用過濾法,半微量分析中則用離心分離法。常用的旋轉裝置有手搖離心機和電動離心機(通常轉速為1}4千周/分),分離速度遠比過濾為快。

應用

膠體化學

1924年瑞典的丁.斯韋德貝里設計了超速離心機,這是一種以極高的角速度運轉的離心機,1940年獲得的離心加速度30萬倍於重力加速度,它和30年代多層吸附理論的建立,以及40年代疏液膠體穩定理論的建立,可說是近半世紀中膠體化學(見膠體和表面化學)領域內的三大成就。超速離心機的分離原理是,當一個含有聚合物或巨分子的溶液,在離心力是重力的25萬倍時,分子相互分離,純溶劑留在界面以上,這個界面以一定速度向容器低部移動。若溶質的分子量不均勻,這個界面上的濃度梯度也不均勻,則那些分子量低的會落在大分子之後。用光學儀器可觀察出這個界面,從而精確測定沉降速率,而每種成分的沉降速率又與其分子量有關,因而可以計算出各成分的分子量。超速離心機不僅能分離膠粒,更重要的是它能測定膠粒的沉降速率、平均分子量及混合體系的重量分布,因而在膠體化學研究(尤其是親液膠體)中起了重大的作用。

高分子化學

超速離心機的出現為對高分子溶液的深入了解提供了一種有力的研究手段。1940年斯韋德貝里使用超速離心法測定了分子量及其分布,可直接測定幾萬至幾百萬的分子量。高分子化合物分子量測定方法的出現,極大地推動了高分子化學的發展,許多天然高分子屬於單一分散體系(所有分子都持同一分子量),對這種系統,超速離心法是最好的分子量測定法,比滲透壓、光散射和粘度等測定法更好。

生物化學超速離心法

同樣為生物化學提供了一種強有力的研究手段。斯韋德貝里應用超速離心法測量了蛋白質分子在水中的沉降速率,從而能計算蛋白質的分子量。他的一些測定結果如下:牛胰島素:46 000:人血紅球:63 000:人血清球:153 000:章血血清:2800 000:煙草花葉病毒:31 400000。超速離心法還經常用於蛋白質的降解、分離、精製以及分子量分布測定。細胞研究中常用一種分帶或區域離心機,用一個大容量旋轉室,根據密度梯度離心分離原理來分離細胞。

環境保護離心分離法

常用於:①離心過濾,藉助離心作用從漿料中排除液體,漿料被引入一快速旋轉的網籃中,固體留在多孔的網上,液體則受離心作用從濾餅中擠出:或利用旋轉器中的離心力使輕重物質分開,重物質以稠泥漿的形式通過噴嘴流走。常用設備為離心過濾機。②離心沉降,懸浮固體在離心力作用下移向或離開旋轉中心,這樣就可聚集在一個區域內而被移出,可以使顆粒的沉澱時間從幾小時減至幾分鐘。常用設備為離心沉降器。③離心捕集,用於從煤煙、空氣流中分離出0. 1 } 1000微米的小顆粒物質,是治理空氣污染的有效手段之一。常用設備為離心捕集器,也稱微粒收集器、旋風除塵器。

其他應用

工業中常用離心除渣器來淨化紙漿漿料,使漿料高速迴轉或產生迴轉旋渦作用,把塵粒分離出來。還常用離心乾燥機,或稱離心脫水機,依靠離心力將水分脫去。

展望離心分離法與其他方法相結合,可以產生新的更為有效的分離方法,這是離心分離法的現代發展方向。在這方面,離心分離法與色譜法結合而產生的場流分級法(或稱外力場流動分餾法)就是一個典型例子。1966年J. C.吉丁斯提出一類新的無固定相的色譜分離法,即場流分級法,或稱單相色譜。這種方法的最初構思,是以離心力壓迫分子於柱壁而代替固定相的保留作用,這樣產生的分離方法稱離心色譜,也叫沉積場流分級法。後來依據這一基本思想,以電場、磁場、熱梯度等代替離心力場,得到不同的場流分級法,從而建立了一類分離方法體系。場流分級法不但對大分子和膠體有很強的分離能力,而且它也能分離分子量小於103的物質和大於30微米的遠遠超出膠體範圍的固體顆粒,其可分離的分子量有效範圍約為103101',這樣寬的連續分離範圍是空前未有的。

近年來出現的離心製備薄層色譜法是離心分離法滲透於色譜領域而產生的又一種高效分離法。層析薄板為圓形,樣品注射於圓心四周,從垂直於圓心的方向連續地加入展開劑,薄板旋轉,各不同組分即沿徑向迅速展開。在紫外燈照射下可觀察到譜帶的移動,由於板面設置是傾斜的,可沿斜向直接接收各分開的組分。該法已用於天然產物、合成產物及異構體等的快速分離提純,分離效果優於製備薄層色譜和柱層色譜法,在一定程度上與製備型高壓液相色譜法相似,但在節省時間和溶劑等方面優於後者。利用離心力將溶液中密度不同的成分進行分離,從而發明了一種設備--離心分離機。

圖書信息

書 名: 離心分離

作 者:金綠松,林元喜

出版社: 化學工業出版社

出版時間: 2008-8-1

ISBN: 9787122030368

開本: 16開

定價: 49.00元

內容簡介

離心技術是利用不同物質之間的密度等差異,用離心力場進行分離和提取的物理分離分析技術,廣泛用於生物學、醫學、農學、化學、化工等領域。本書對離心分離技術從原理到實踐進行了較詳細的介紹,尤其重點介紹了在生物學科研和生產中的實例。因此,在離心分離技術的理論和實際應用中,本書可起到工具書的作用。

本書可供生物學、農學、醫學、化學、化工等領域的科研人員、實驗室人員、管理人員和設備維修人員等參考。

圖書目錄

第1章 離心機發展與離心技術概述

第2章 離心機與轉子

第3章 差速離心

第4章 梯度介質及梯度的製備和密度測定

第5章 速率區帶離心法

第6章 等密度離心法

第7章 細胞分離

第8章 細胞器和細胞膜的分離

第9章 分離生物大分子

第10章 在區帶轉子中的分離

第11章 分析超速離心技術及其應用

第12章 與離心機有關的其他分離技術概述

參考來源