放射自顯影
表 自顯影實驗中常用核素的半衰期與能量
名稱 半壽期 粒子類型 能量(MeV) 名稱 半壽期 粒子類型 能量(MeV) 3H 12.3 yr β 0.018 45Ca 152 d β 0.26 11C 20 min β 0.981 59Fe 45 d β 0.46 14C 5700 yr β 0.155 γ 1.30 32P 14.3 d β 1.71 60Co 5.3 yr β 0.308 35S 87.2 d β 0.167 64Cu 12.8 hr β 0.657 131I 8.0 d β 0.25 γ 1.35
autoradiography
放射自顯影的原理是利用放射性同位素所發射出來的帶電離子(α或β粒子)作用於感光材料的鹵化銀晶體,從而產生潛影,這種潛影可用顯影液顯示,成為可見的"像",因此,它是利用鹵化銀乳膠顯像檢查和測量放射性的一種方法。 放射性核素的原子不斷衰變,當衰變掉一半時所需要的時間稱為半衰期。各种放射性核素的半衰期長短不同(表),在自顯影實驗中多選用半衰期較長者。對於半衰期較短的核素,應選用較快的樣品製備方法,所用劑量也應加大。 [1]
放射自顯影技術
放射自顯影術(radioautography;autoradiography)用於研究標記化合物在機體、組織和細胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用機理、作用部位等等。其原理是將放射性同位素(如14C和3H)標記的化合物導入生物體內,經過一段時間後,將標本製成切片或塗片,塗上鹵化銀乳膠,經一定時間的放射性曝光,組織中的放射性即可使乳膠感光。然後經過顯影、定影處理顯示還原的黑色銀顆粒,即可得知標本中標記物的準確位置和數量,放射自顯影的切片還可再用染料染色,這樣便可在顯微鏡下對標記上放射性的化合物進行定位或相對定量測定。
這種技術與電鏡樣品處理,則為電鏡放射自顯影。
由於有機大分子均含有碳、氫原子,故實驗室一般常選用14C和3H標記。14C和3H均為弱放射性同位素,半衰期長,14C為5730年,3H為12.5年。一般常用3H胸腺嘧啶脫氧核苷(3H-TDR)來顯示DNA,用3H尿嘧啶核苷(3H-UDR)顯示RNA;用3H氨基酸研究蛋白質,研究多糖則用3H甘露糖、3H岩藻糖等。 [2]