高氏1號培養基檢視原始碼討論檢視歷史
| 高氏1號培養基 |
高氏一號培養基是用來培養和觀察放線菌形態特徵的合成培養基。如果加入適量的抗菌藥物，則可用來分離各种放線菌。
基本信息
中文名； 高氏1號培養基
可溶性澱粉； 2g
瓊脂； 2g
自來水； 100mL
pH； 7.2~7.4
製備
基本原理
此合成培養基的主要特點是含有多種化學成分已知的無機鹽，這些無機鹽可能相互作用而產生沉澱。因此，混合培養基成分時，一般是按配方的順序依次溶解各成分，甚至有時還需要將兩種或多種成分分別滅菌，使用時再按比例混合。
配方； KNO3 0.1g
K2HPO4 0.05g
MgSO4· 7H2O 0.05g
NaCl 0.05g
FeSO4· 7H2O 0.001g (母液)
滅菌 1.05kg/cm2，20min
配製時，先用少量冷水，將澱粉調成糊狀，倒入少於所需水量的沸水中，在火上加熱，邊攪拌邊依次逐一溶化其他成分，溶化後，補足水分到100ml，調pH，121℃滅菌20min。
高溫滅菌後，倒平皿前加入10%酚2滴至100ml培養基中混勻，將培養基倒入平皿內約15ml/皿。
高氏1號: 可溶性澱粉(20g)，KNO3(1g)，K2HPO4(0.5g)，MgSO4· 7H2O(0.5g)，NaCl(0.5g)，FeSO4· 7H2O(0.01g)，瓊脂 20g，pH=7.4-7.6
操作器材
1、溶液與試劑 可溶性澱粉， NaCI ， KNO3 ， K2 HPO4 .3H2 O MgSO4 .7 H2 O ， FeSO4 .7 H2 O， 瓊脂，1mol/LNaOH, 1mol/LHCI。 2、儀器與其他用具 試管，錐形瓶，燒杯，量筒，玻璃棒，培養基分裝器，天平，高壓蒸汽滅菌器，PH試紙，棉花，牛皮紙，麻繩，紗布等。
操作步驟
1、稱量和溶化 按配方先稱取可溶性澱粉，放入小燒杯中，並用少量冷水將澱粉調成糊狀，再加入少於所需水量的沸水中，繼續加熱，使可溶性澱粉完全溶化。然後再稱取其他各成分，並依次溶化，對微量成分FeSO4 .7 H2 O可先配成高濃度的貯備 液，按比例換算後再加入。待所有試劑完全溶解後，補充水分到所需的總體積。 配製固體培養基時，將稱好的瓊脂放入已溶的試劑中，在加熱融化，最後補充所損失的水分。
2、調pH 用試紙測培養基的原始PH,如果偏酸，用滴管向培養基中加入1mol/LNaOH,邊滴邊攪拌，並隨時用pH試紙測其pH,直至pH達7.6。反之，用1mol/LHCI進行調節。
3、分裝和加塞 將配製的培養基分裝入試管內，在試管口或錐形瓶口上塞上棉塞。
4、包紮 加塞後，將全部試管用麻繩捆好，再在棉塞外包一層牛皮紙，其外再用一根麻繩紮好。用記號筆註明培養基名稱、組別、配製日期。
5、 滅菌 將上述培養基以1210C,20min,0.103MPa高壓蒸汽滅菌。
6、擱置斜面 將滅菌的試管培養基冷卻至500C左右，將試管口端擱在玻璃棒上。斜面的斜度要適當，使斜面的長度約為管長 1/3。
7、無菌檢查 將滅菌培養基放入370C的培養箱中培養24~28h，以檢查滅菌是否徹底。
和改良的差別就在於有沒有FeSO4· 7H2O 高氏常常配完後變成褐色也是由於Fe2+氧化為Fe3+的關係，所以常常有人用螯合的FeSO4，防止氧化。
作用
1 篩選
2 培養放線菌[1]