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质粒扩增

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质粒扩增是大量获取质粒的一种化学生物学方法，通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌中，然后从大肠杆菌中收获大量质粒的过程。

基本信息

中文名； 质粒扩增

目 的； 收获大量质粒

类型； 化学生物学方法

步骤； 细菌铺板挑选菌落摇菌裂解抽提

质粒扩增

质粒扩增是大量获取质粒的一种化学生物学方法，通常包括将细菌质粒转化到大肠杆菌中，然后从大肠杆菌中收获大量质粒的过程。

步骤

细菌铺板:让细菌在LB培养基上生长，培养基上为了防止杂菌生长，会加入抗生素，而含有目标质粒的细菌带有抗生素的抗性，能够正常生长，从而保证板子上长出来的会是目标菌落。

挑选菌落:从LB培养基上挑选菌落备用

细菌培养:将挑好的菌落放到大肠杆菌培养液当中，并于37摄氏度培养箱中以250rpm摇动8~12h，使大肠杆菌繁殖

裂解抽提:采用细胞裂解的方式，从含目标质粒的大肠杆菌菌液中将质粒提取出来

用途介绍

这一实验主要用于获取较多的质粒，质粒扩增需要的源头质粒量非常小，1微克的质粒都已经能够满足扩增的需要，这也使得质粒的使用和赠送变得非常容易。质粒的用途往往是用于转染细胞，通过转染的方式让细胞表达质粒中携带的基因，从而研究该基因对应蛋白的性能。 在基础细胞生物学研究中起着非常重要的作用。