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| style="background: #008080" align= center|  '''<big> Shrna</big> '''

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[[File:T013626a20c169e8823.jpg |缩略图|居中|[https://p1.ssl.qhimg.com/t013626a20c169e8823.jpg   原图链接][https://baike.so.com/gallery/list?ghid=first&pic_idx=1&eid=6821288&sid=7038373   来自 360 的图片]]]
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shRNA是英文单词short hairpin RNA的缩写。翻译为"短发夹RNA"。shRNA包括两个短反向重复序列。克隆到shRNA表达载体中的shRNA包括两个短反向重复序列，中间由一茎环(loop)序列分隔的，组成发夹结构，由polⅢ启动子控制。随后再连上5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。

在活体中输送"小干扰RNA"(siRNA)的一种办法是，将siRNA序列作为"短发夹"克隆进质粒载体中。当送入[[动物]]体内时，该发夹序列被表达出来，形成一个"双链RNA"(dsRNA)，并被RNAi通道处理。然而，对成年[[小鼠肝脏]]中shRNA的表达的长期效应所做的一项研究为我们敲响了警钟。该研究结果表明，很多shRNA在小鼠中表达时是有毒的。这种经常是致命的毒性似乎是由shRNA与内生微RNA之间为与Exportin-5结合所展开的竞争造成的。Exportin-5是一个参与将分子输送出细胞核的因子。人们对开发基于shRNA的疗法非常感兴趣，而此前几乎没有证据表明shRNA在活体中有很强毒性。
=='''基本信息'''==
中文名称;
短发夹RNA

外文名称;
short hairpin RNA 

缩写;
shRNA

包括;
两个短反向重复序列

实验载体;
成年小鼠

竞争者;
内生微RNA
=='''设计'''==
1. 克隆到shRNA表达[[载体]]中的shRNA包括两个短反向重复序列，中间由一茎环(loop)序列分隔的，组成发夹结构，由pol Ⅲ启动子控制。随后再连上5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。

2. 两个互补的寡核苷酸两端须带有限制性酶切位点。<ref>[http://www.360doc.com/content/18/0126/21/50153987_725362616.shtml  shRNA跟siRNA的区别], 个人图书馆 , 2018-08-19</ref>

3. Stratagene发现29个寡核苷酸较之原先推荐的23个[[寡核苷酸]]可以更有效地抑制目的基因。

4. 在启动子下游的酶切位点下方紧连一个C，使插入片段和启动子有一定空间间隔以确保转录的发生。

5. ShRNA目的序列的第一个碱基必须是G以确保RNA聚合酶转录。如果选择的目的[[序列]]不以G开头，必须在紧连正义链的上游加一个G。

6. shRNA插入片段中的茎环应当靠近寡核苷酸的中央。不同大小和核苷酸序列的茎环都被成功的运用过。其中包含一个独特的限制性酶切位点的茎环利于检测带有shRNA插入片段的克隆。在比较了众多不同长度和序列的茎环，5'TCAAGAG3'序列最为有效。

7.5-6个T必须放置在shRNA插入片段尾部以确保RNA聚合酶III终止转录。

8.在正义链和反义链序列上不能出现连续3个或以上的T。这可能导致shRNA转录的提前终止。
=='''参考文献'''==
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[[Category:360 生物科學總論]]