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親和

來自 攝圖網 的圖片

親和 讀音qīn hé,詞義:1、親切和藹;2、親近 和合。3、物質之間性質相近,可以相互包容

目錄

基本信息

中文名稱 親和 [1]

拼音 qīn hé [2]

解釋一 親切、和藹(親切,易於接近)

解釋二 親近和合

簡介

親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結合。現在使用更多的是從鏈黴菌中提取的鏈親和素(strepavidin)。生物素(biotin)又稱維生素H,分子量244.31,存在於蛋黃中。用化學方法製成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(biotin-hydroxysuccinimide,BNHS)可與蛋白質、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產物。親和素與生物素的結合,雖不屬免疫反應,但特異性強,親和力大,兩者一經結合就極為穩定。由於1個親和素分子有4個生物素分子的結合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的複合體。因此把親和素和生物素與ELIS偶聯起來,就可大提高ELISA的敏感度。

生物素在人體內是不能單獨起作用的,它需要與其他酶、氨基酸脂肪衍生物等結合來綜合調控。生物素結合常數即表示了它與其他有機分子結合能力的大小。

類別

親合素主要包括卵白親合素、鏈親合素、卵黃親合素及類親合素等。後兩種因其特異性親合力低,研究不多,前兩種目前已深入研究並得到廣泛應用。

各類介紹

1.親和素(Avidin,A) 親合素又稱卵白蛋白或抗生物素,分子量為68000,pI 10~10.5;在pH9~13緩衝液中性質均穩定,耐熱並耐多種蛋白水解酶的作用。天然親合素為鹼性蛋白,由4個相同的亞單位構成4聚體;每個親合素亞單位通過其結構中的色氨酸殘基與生物素中的Ureido環(I環)結合。因此,1個親合素分子存在4個與生物素分子結合位點,其結合常數(Ka)高 達1015mol/L。

通常,親合素的活性單位是以親合素結合生物素的量來表示的,即以能結合1Pg生物素所需要的親合素量為1個親合素活性單位。一般1Pg親合素約含13~15個活性單位。

2.鏈霉親合素(Streptavidin,SA) 鏈霉親合素(SA)是與親合素(A)有類似生物學特性的一種蛋白質。是由Strept

omyces avidin菌在培養過程中分泌的一種蛋白質產物,SA也可通過基因工程手段生產。SA分子量為65000,由4條序列相同的肽鏈構成,每條SA肽鏈可以結合1個生物素分子。因此與A一樣,每個SA分子也具有4個可與生物素分子結合位點,其結合常數與A相同為1015mol/L。約為抗原抗體間ka(105~1011 mol/L)的1萬倍以上。

SA與A的ka雖然相同,但在實際應用中其檢測靈敏度明顯優於A,其原因是SA為 略偏酸性的蛋白。SA的每條肽鏈含159個氨基酸殘基,其中賴氨酸、精氨酸等鹼性氨基酸的含量比一般親合素少,反之含酸性氨基酸較多,其等點為6.0,較A(pI=10)為低,同時在結構中SA不含任何糖基,而A含糖可高達10%。A的高pI及高含糖結構導致在聚苯乙烯板和硝酸纖維素膜上或與組織細胞DNA結合時,易產生一定程度的非特異性結合,造成較高的顯色背景,而SA較A在應用中明顯克服了這一缺點。

SA最高的活性可達18u,較A高(15u);與A一樣,每個SA分子也具有4個可與生物素分子結合位點,故其效應相同。

參考來源