質粒擴增

質粒擴增

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質粒擴增是大量獲取質粒的一種化學生物學方法，通常包括將細菌質粒轉化到大腸桿菌中，然後從大腸桿菌中收穫大量質粒的過程。

目錄

基本信息

中文名； 質粒擴增

目 的； 收穫大量質粒

類型； 化學生物學方法

步驟； 細菌鋪板挑選菌落搖菌裂解抽提

質粒擴增

質粒擴增是大量獲取質粒的一種化學生物學方法，通常包括將細菌質粒轉化到大腸桿菌中，然後從大腸桿菌中收穫大量質粒的過程。

步驟

細菌鋪板:讓細菌在LB培養基上生長，培養基上為了防止雜菌生長，會加入抗生素，而含有目標質粒的細菌帶有抗生素的抗性，能夠正常生長，從而保證板子上長出來的會是目標菌落。

挑選菌落:從LB培養基上挑選菌落備用

細菌培養:將挑好的菌落放到大腸桿菌培養液當中，並於37攝氏度培養箱中以250rpm搖動8~12h，使大腸桿菌繁殖

裂解抽提:採用細胞裂解的方式，從含目標質粒的大腸桿菌菌液中將質粒提取出來

用途介紹

這一實驗主要用於獲取較多的質粒，質粒擴增需要的源頭質粒量非常小，1微克的質粒都已經能夠滿足擴增的需要，這也使得質粒的使用和贈送變得非常容易。質粒的用途往往是用於轉染細胞，通過轉染的方式讓細胞表達質粒中攜帶的基因，從而研究該基因對應蛋白的性能。 在基礎細胞生物學研究中起着非常重要的作用。