核糖核酸酶

來自 孔夫子舊書網 的圖片

核糖核酸酶是一個科技名詞。

世界三大漢語詞典分別是中國大陸的《 漢語大詞典》(共13冊，5.6萬詞條，37萬單詞)、中國台灣的《 中文大辭典 》(共10冊，5萬詞條，40萬單詞)以及日本的《 大漢和辭典 》(共13冊，4.9萬詞條，40萬單詞)。漢字是記錄漢語的文字，它已有六千年左右的歷史，是世界上最古老的文字之一。

目錄

名詞解釋

指能水解RNA磷酸二酯鍵的酶稱核糖核酸酶(ribonuclease，RNase)。不同的RNase其專一性不同，例如牛胰核糖核酸酶(RNase I)，它的作用位點是嘧啶核苷3』一磷酸與其他核苷酸之間的連接鍵，而核糖核酸酶T1(RNase T1)的作用位點是3』鳥苷酸與其他相鄰核酸之間的5』一OH間的連鍵。

理化性質

核糖核酸酶，白色粉末。為具有球蛋白性狀的一種蛋白質。溶於水、50%丙酮。此酶最適宜溫度為60℃，85℃以上失去作用，最適宜的pH值為7.6。是催化核糖核酸水解的一種核酸內切酶，可使胞嘧啶核酸解聚。對胸腺核酸則無作用。用於生化研究。

作用與用途

核糖核酸酶能催化核糖核酸（RNA）的降解，現已能人工合成。據報道，核糖核酸酶能改變宿主細胞新陳代謝，抑制病毒合成，在體外能抑制流感病毒增殖，在雞胚內能抑制痘苗、皰疹病毒形成。臨床用核糖核酸酶每天肌注180毫克，對治療流行性腦炎有益。

分類

（一）核糖核酸酶A

核糖核酸酶A（RNase A）來源於牛胰臟，是一種內切核糖核酸酶，可特異攻擊RNA上嘧啶殘基的3』端，切割胞嘧啶或尿嘧啶與相鄰核苷酸形成的磷酸二酯鍵，反應終產物是3』嘧啶核苷酸和末端帶3』嘧啶核苷酸的寡核苷酸。無輔助因子及二價陽離子存在時，核糖核酸酶A的作用可以被胎盤RNA酶抑制劑（RNasin）或氧釩一核糖核苷複合物（vanadyl—ribonuclosidecomplex，VRC）所抑制。RNase A的反應條件極廣，且極難失活。在低鹽濃度（0～100 mmol/l NaCl）下，RNase A切割單鏈和雙鏈RNA、DNA：RNA雜交體中的RNA；當NaCl濃度為300 mmol/l。或更高時，RNase A就特異性切割單鏈RNA。去除反應液中的RNase A，通常需要蛋白酶K處理、酚反覆抽提和乙醇沉澱。在分子克隆中，核糖核酸酶A的主要用途為：

①從DNA：RNA雜交體中去除未雜交的RNA區。

②確定RNA或DNA中的單鹼基突變的位置。在RNA：DNA或RNA：RNA雜交體中，若存在單鹼基錯配，可用RNAse A識別並切割。通過凝膠電泳分析切割產物的大小，即可確定錯配的位囂。

③RNA檢測。RNA酶保護分析法（RNase protection assay）是近年來發展起來的一種檢測RNA的雜交技術。其基本原理是利用單鏈RNA探針，與待測的RNA樣品進行雜交形成RNA：RNA雙鏈分子，由於RNA酶可專一性地降解未雜交的單鏈RNA，而雙鏈受到保護不被降解，經凝膠電泳可以確定目的RNA的長度。該方法靈敏度較Northern雜交法更高，並可進行較為準確的定量。選擇適當的探針，還可進行基因轉錄起始位點分析及內含子（也稱內元）剪切位點分析等研究。此法的靈敏度比核酸酶S1保護分析法高數倍。

④降解DNA製備物中的RNA分子。須使用無DNase的RNase（DNase I free RNase），市售的一般RNase A常含有DNase，可在100 retool/I Tris—HCI（pH 7.5）和15 mmol/l。NaCI溶液中100℃加熱15 min，以去除之。