無菌操作

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無菌操作是中國的一個科技名詞。

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目錄

名詞解釋

無菌操作，是指在無菌室或超淨台中進行以防止微生物進入人體或污染供試菌的操作技術。無菌操作是各種生物實驗和生產實踐中一項重要的基本操作。無菌操作的要求是：操作前將操作空間中的細菌和病毒等微生物殺滅；操作過程中保證操作空間與外界隔離，避免微生物的侵入。

操作方式

用於防止微生物進入人體組織或其它無菌範圍的操作技術稱為無菌操作。如外科手術需防止細菌進入傷口．在各種生物實驗中,為了防止微生物地生長和繁殖影響實驗的進行,也要在無菌的環境下進行.

要求

1操作前將界面上的細菌和病毒等微生物殺滅。

2操作過程中是界面與外界隔離,避免微生物的侵入。

注意事項

無菌操作原則：

1、環境要清潔，進行無菌操作前半小時，須停止清掃地面等工作。避免不必要的人群流動，防止塵埃飛揚。治療室應每天用紫外線消毒一次。

2、在執行無菌操作時，必須明確物品的無菌區和非無菌區。

3、執行無菌操作前，先戴帽子、口罩、洗手，並將手擦乾，注意空氣和環境清潔。

4、夾取無菌物品，必須使用無菌持物鉗。 進行無菌操作時，凡未經消毒的手、臂、均不可直接接觸無菌物品或超過無菌區取物。

5、無菌物品必須保存在無菌包或滅菌容器內，不可暴露在空氣中過久。無菌物與非無菌物應分別放置。無菌包一經打開即不能視為絕對無菌，應儘早使用。凡已取出的無菌物品雖未使用也不可再放回無菌容器內。

6、無菌包應按消毒日期順序放置在固定的櫃櫥內，並保持清潔乾燥，與非滅菌包分開放置，並經常檢查無菌包或容器是否過期，其中用物是否適量。

7、無菌鹽水及酒精、新潔爾滅棉球罐每周消毒一次，容器內敷料如干棉球、紗布塊等，不可裝得過滿，以免取用時碰在容器外面被污染。

無菌操作技術及注意事項

1、玻璃器皿的消毒和清潔

⑴新購玻璃器皿的處理

新購玻璃器皿應用熱肥皂水洗刷，流水沖洗，再用1%～2%鹽酸溶液浸泡，以除去游離鹼，再用水沖洗。對容量較大的器皿如試劑瓶、燒瓶或量具等，經清水洗淨後應注入濃鹽酸少許，慢慢轉動，使鹽酸布滿容器內壁數分鐘後傾出鹽酸，再用水沖洗。

⑵污染玻璃器皿的處理

①一般試管或容器可用3%煤酚皂溶液或5%石炭酸浸泡，再煮沸30分鐘，或在3%～5%漂白粉澄清液內4小時，有的亦可用肥皂或合成洗滌劑洗刷使儘量產生泡沫，然後用清水沖洗至無肥皂為止。最後用少量蒸餾水沖洗。

②細菌培養用的試管和培養皿可先行集中，用1kg/cm2高壓滅菌15～30分鐘，再用熱水洗滌後，用肥皂洗刷，流水沖洗。

③吸管使用後應集中於3%煤酚皂溶液中浸泡24小時，逐支用流水反覆沖洗，再用蒸餾水沖洗。

④油蠟沾污的器皿，應單獨滅菌洗滌，先將沾有油污的物質棄去，倒置於吸水紙上，100℃烘乾半小時，再用鹼水煮沸，肥皂洗滌，流水沖洗。必要時可用二甲苯或汽油去油污。

⑤染料沾污的器皿，可先用水沖洗，後用清潔或稀鹽酸洗脫染料，再用清水沖洗。一般染色劑呈鹼性，所以不宜用肥皂的鹼水洗滌。

⑥玻片可置於3%煤酚皂溶液中浸泡，取出後流水沖洗，再用肥皂或弱鹼性煮沸，自然冷卻後，流水沖洗。被結核桿菌污染或不易洗淨的玻片，可置於清潔液內浸泡後再沖洗。

2、無菌器材和液體的準備

將玻璃器具中的培養皿、培養瓶、試管、吸管等按上述方法洗淨烘乾後，用一潔淨紙包好瓶口並把吸管尾端塞上棉花，裝入乾淨的鋁盒或鐵盒中，於120℃的乾燥箱中乾燥滅菌2小時，取出備用。對於手術器械、瓶塞、工作服以及新配製的PBS洗液，則採用高壓蒸氣滅菌法，即在15磅的條件下，加熱20分鐘。而對於MEM培養液、小牛血清和消化液等需用G5或G6濾器負壓抽濾後使用。

3、無菌操作過程在無菌操作過程中，最重要的是要保持工作區的無菌、清潔。因此，在操作前20～30分鐘要先啟動超淨台和紫外燈，並認真洗手和消毒。在操作時，嚴禁喧譁，嚴禁用手直接拿無菌物品，如瓶塞等，而必須用消毒的止血鉗、鑷子等。培養瓶應在超淨台內操作，並且在開啟和加蓋瓶塞時需反覆用酒精燈燒。對於吸管應先用手拿後1/3處，戴上膠皮乳頭，並用酒精燈燒烤之後再吸液體。

4、常用清潔液的配製法

⑴重鉻酸鉀清潔液：可根據不同需要，選用下列的任何一種濃度。先將重鉻酸鉀溶於水中，再慢慢加入濃硫酸。注意，此時可產生高熱，應防止容器破裂。重鉻酸鉀清潔液除污力強，腐蝕性大，應避免接觸皮膚和衣服。為防止吸收空氣的水分而變質，此液應貯存於帶蓋的容器中。如清潔效力較差，可再加入少量重鉻酸鉀及濃硫酸，還可繼續使用。直到液體變藍綠色，即不能再用。配製重鉻酸鉀清潔液時，宜用耐高溫的陶瓷缸或耐酸搪瓷或塑料容器。使用玻璃器皿時，應特別注意防止產生高熱而破裂，切忌用量筒來配製。

⑵磷酸三鈉將其配成5%～10%水溶液，可用於洗滌玻璃器皿上的油污，但經常使用腐蝕玻璃，使器皿表面模糊、毛糙。

⑶硝酸清潔液將其配成50%水溶液，可用於清潔微量滴定筒。⑷乙二胺四乙酸二鈉（EDTA鈉鹽）將其配成5%～10%水溶液，可洗脫粘附於玻璃器皿內壁的白色沉澱物。⑸尿素溶液尿素是溶解蛋白質的良好溶劑，適用於洗滌粘附有血液血清等蛋白質的吸管、試管等。