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TE缓冲液
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{| class="wikitable" align="right" |- | style="background: #FF2400" align= center| '''<big>TE缓冲液</big>''' |- |<center><img src=https://p1.ssl.qhimg.com/t012b99bbbb8ebc12a6.jpg width="300"></center> <small>[https://baike.so.com/gallery/list?ghid=first&pic_idx=1&eid=5504501&sid=5740245 来自 呢图网 的图片]</small> |- | style="background: #FF2400" align= center| '''<big></big>''' |- | align= light| 中文名: TE缓冲液 外文名: Tris-EDTA buffer solution 结 构: 由Tris和EDTA配制而成 作 用: 用于溶解DNA,能稳定储存DNA |} '''TE缓冲液'''是由Tris和EDTA配制而成,主要用于溶解核酸,能稳定储存DNA和RNA。TE缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。 PH缓冲系统对维持生物的正常pH值,正常生理环境起重要作用。多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动,而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系,它们是[[蛋白质]]、[[重碳酸盐缓冲体系]]和[[磷酸盐缓冲体系]]。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。<ref>[https://wenda.so.com/q/1460431124724221 TE缓冲液的配制方法],360回答 , 2014-06-23</ref> TE缓冲溶液(Tris-EDTA buffer solution) 在生化研究工作中,常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到我们工作的成效。如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大,会使酶活性下降甚至完全失活。所以我们要学会配制缓冲溶液。 由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。生化实验室常常用的缓冲系主要有[[磷酸]]、[[柠檬酸]]、[[碳酸]]、[[醋酸]]、[[巴比妥酸]]、[[Tris(三羟甲基氨基甲烷)]]等系统,在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如[[硼酸盐]]、[[柠檬酸盐]]、[[磷酸盐]]和[[三羟甲基甲烷]]等缓冲剂都可能产生不需要的反应。 硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。 柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。 磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。 三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点是温度效应,这点往往被忽视。在室温pH是7.8的Tris一缓冲液,在4℃时是8.4,在37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下,缓冲能力差。 ==配制== 1×TE Buffer 组成浓度:10mMTris-HCl1mM EDTA PH=8.0 配制量:500ml 配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中 1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml 0.5M EDTA PH=8.0 1ml 向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存. TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在TE中的稳定性较好,不易被破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液中保存. ==用途== TE缓冲液是Tris +EDTA缓冲液,这种缓冲液我们一般用作溶解剂或保持剂,主要是调控PH,TAE是一种电泳缓冲液,主要用于DNA分子的电泳。 TE组成浓度:10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0 配制量:500ml 配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中 1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml 0.5M EDTA PH=8.0 1ml 向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存. TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。 50×TAE Buffer 配制方法: 1. 称量Tris 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中; 2.向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌均匀; 3加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解; 4.加去离子水定容至1L后,室温保存。 == 参考来源 == {{reflist}} [[Category:340 化學總論]]
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