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[[File: 绿色萤光蛋白1.jpg|320px|缩略图|右|<big> 绿色萤光蛋白</big>[https://www.loybio.com/data/attachment/forum/201311/05/213856tdb0d4gqxv24ixvt.jpg 原图链接][https://www.loybio.com/biowiki/t2601/ 来自 乐研生物 的图片]]] '''绿色萤光蛋白'''(Green fluorescent protein,简称GFP),是一个由约238个[[氨基酸]]组成的[[蛋白质]],从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色萤光。虽然许多其他海洋生物也有类似的绿色荧光蛋白,但传统上,绿色荧光蛋白(GFP)指首先从维多利亚多管发光水母中分离的蛋白质<ref>[https://www.sohu.com/a/259130421_227596 【干货】 神奇的荧光蛋白] ,搜狐,2018-10-12</ref>。这种蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在维多利亚多管发光水母中发现。这个发光的过程中还需要冷光蛋白质[[水母素]]的帮助,且这个冷光蛋白质与[[钙离子]](Ca2+)可产生交互作用。 在维多利亚多管发光水母中发现的野生型绿色萤光蛋白,395nm和475nm分别是最大和次大的激发波长,它的发射波长的峰点是在509nm,在[[可见光谱]]中处于绿光偏蓝的位置。绿色荧光蛋白的荧光量子产率(QY)为0.79。而从海肾(sea pansy)所得的绿色萤光蛋白,仅在498nm有一个较高的激发峰点。 在细胞生物学与分子<ref>[https://www.sohu.com/a/236636170_644220 生活中的分子---绿色荧光蛋白质 /Green Fluorescent Protein (GFP)] ,搜狐,2018-06-19</ref>生物学中,绿色萤光蛋白(GFP)基因常用做报导基因(reporter gene)。,绿色萤光蛋白基因也可以克隆到[[脊椎动物]](例如:[[兔子]])上进行表现,并拿来映证某种假设的实验方法。通过基因工程,绿色萤光蛋白(GFP)基因能稳转进不同物种的基因组,在后代中持续表达。现在,绿色萤光蛋白(GFP)基因已被导入并表达在许多物种,包括[[细菌]],酵母和其他[[真菌]],鱼(例如斑马鱼),[[植物]],[[苍蝇]],甚至人等的哺乳动物细胞。 2008年10月8日,日本[[科学家]]下村脩、美国科学家马丁·查尔菲和钱永健因为发现和改造绿色[[荧光蛋白]]而获得了当年的[[诺贝尔化学奖]]。 ==历史== ===野生型GFP(wtGFP)=== 在1960年代和1970年代,[[绿色]]萤光蛋白,连同分开发光蛋白水母素,首先从维多利亚多管发光水母被纯化,及其属性被下村修研究。 ===GFP衍生物=== [[圣地亚哥]]海滩画说明[[基因突变]]的多样性,活细菌表达8种不同[[颜色]]的萤光蛋白。 由于对广泛使用的潜力和研究人员不断变化的需求,绿色萤光蛋白的许多不同的[[突变体]]已被改造设计。 ==结构== 野生型绿色荧光蛋白,最开始是 238 个氨基酸的[[肽链]],约 25KDa。然后按一定规则,11 条β-折叠在外周围成圆柱状的栅栏;圆柱中,α-螺旋把发色团固定在正几乎中心处。发色图被围在中心,能避免偶极化的[[水分子]]、顺磁化的[[氧分子]]或者顺反异构作用与发色团,致使荧光猝灭。 荧光是荧光蛋白最特别的特点,而其中的发色团起着主要的作用。在 α-螺旋上的 65、66、67位[[氨基酸]]——[[丝氨酸]]、[[酪氨酸]]、甘氨酸经过环化、脱氢等作用后形成发色团。有意思的是,发色团形成过程是由外周栅栏上的残基催化,底物只需要氧气。这暗示绿色荧光蛋白被广泛用于不同物种的潜力:在不同物种中能独立表达成有功能的蛋白,而不需要额外的因子。不过,现在依然在讨论准确的过程。 发色团上的共轭 π键能吸收[[激发光]]能量,在很短的时间后,以波长更长的发射光释放[[能量]],形成荧光。 ==应用== 由于荧光蛋白能稳定在后代[[遗传]],并且能根据启动子特异性地表达,在需要定量或其他实验中慢慢取代了传统的[[化学]]染料。更多地,荧光蛋白被改造成了不同的新工具,既提供了解决问题的新思路,也可能带来更多有价值的新问题。 ==视频== ===<center> 绿色萤光蛋白 相关视频</center>=== <center>【生物医学大讲堂】钱永健-绿色荧光蛋白的发展史</center> <center>{{#iDisplay:r0325gi98ob|560|390|qq}}</center> <center>绿色荧光蛋白诱导表达</center> <center>{{#iDisplay:t0155iu6d2j|560|390|qq}}</center> ==参考文献== [[Category:360 生物科學總論]]
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